[發明專利]提高油脂中多不飽和脂肪酸含量的方法和微生物油脂的制備方法

在審

• 申請號: 202210507438.3
• 申請日: 2022-05-10
• 公開（公告）號: CN114774484A
• 公開（公告）日: 2022-07-22
• 發明（設計）人: 黃和;陳子雷;郭東升;劉孟珍;孫小曼;李穎風
• 申請（專利權）人: 南京師范大學
• 主分類號: C12P7/6463
• 分類號: C12P7/6463;C12P7/6472;C12N1/14;C12N1/38;C12R1/645
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 黃志興

本發明涉及微生物發酵領域，公開了一種提高油脂中多不飽和脂肪酸含量的方法和微生物油脂的制備方法。提高油脂中多不飽和脂肪酸含量的方法包括：將產油微生物接入添加有調控因子的培養基中進行培養；所述調控因子含有主調控劑，所述主調控劑選自丁基羥基茴香醚、二丁基羥基甲苯、特丁基對苯二酚和對羥基苯甲酸酯中的至少一種。微生物油脂的制備方法包括：將產油微生物采用上述的方法進行培養得到培養液，將所述培養液進行破壁、提取。本發明提供的方法能夠有效提高微生物油脂中多不飽和脂肪酸的含量，簡單高效且成本低。

技術領域

本發明涉及微生物發酵領域，具體地，涉及一種提高油脂中多不飽和脂肪酸含量的方法和微生物油脂的制備方法。

背景技術

日常生活中食用油脂的來源主要包括植物種子、動物脂肪以及微生物油脂。微生物油脂是真菌等微生物在生長過程中積累在細胞內的油脂，其主要成分與動植物油脂的不同在于，大多數微生物油脂含有長鏈多不飽和脂肪酸(PUFA)，如二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)等。這些多不飽和脂肪酸不僅在維持正常生理代謝上發揮重要的作用，而且具有極其重要的生物醫學功能，已成為醫藥和營養學研究的熱點。DHA/EPA的主要醫學保健功能有：調節細胞膜的結構、功能和流動性；對脂質代謝，神經和突觸的生長發育、分化，炎癥反應和氧化反應起調節作用；作為合成炎癥因子的前體，對炎癥反應起抑制作用；對心血管疾病、自身免疫性疾病和炎癥、糖尿病、癌癥和精神方面的疾病都有治療作用。這一類微生物油脂產品已被廣泛應用于成人和嬰幼兒的營養添加劑。

發酵法是獲得微生物油脂，特別是含多不飽和脂肪酸的微生物油脂的成熟工業方法。發酵法利用水相培養基使產油微生物菌株增殖得到有利用價值的生物量后，通過破壞微生物細胞壁使油脂游離，然后分離得到微生物油脂。但是，現有的產油微生物菌株發酵生產含多不飽和脂肪酸的油脂時，仍存在油脂中多不飽和脂肪酸的含量低、生產成本較高等缺陷。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有技術存在的微生物油脂中多不飽和脂肪酸的含量低、生產成本較高的問題，提供一種提高油脂中多不飽和脂肪酸含量的方法和微生物油脂的制備方法，該方法能夠有效提高微生物油脂中多不飽和脂肪酸的含量，簡單高效且成本低。

為了實現上述目的，本發明第一方面提供一種提高產油微生物的DHA產量的方法，該方法包括：將產油微生物接入添加有調控因子的培養基中進行培養；所述調控因子含有主調控劑，所述主調控劑選自丁基羥基茴香醚、二丁基羥基甲苯、特丁基對苯二酚和對羥基苯甲酸酯中的至少一種。

優選地，所述對羥基苯甲酸酯選自對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸正丙酯和對羥基苯甲酸異丙酯中的至少一種。

優選地，所述主調控劑為丁基羥基茴香醚和/或二丁基羥基甲苯。

優選地，所述調控因子還含有輔助調控劑，所述輔助調控劑為磷酸和/或檸檬酸。

優選地，所述培養基中調控因子的含量為0.1-0.5g/L。

優選地，所述調控因子含有丁基羥基茴香醚、二丁基羥基甲苯和檸檬酸，所述丁基羥基茴香醚、二丁基羥基甲苯和檸檬酸的重量比為1-4：1-4：1。

優選地，所述培養的過程包括：將所述產油微生物接種至第一培養基中進行種子培養后得到種子液，將所述種子液以體積比0.5-10％接種至第二培養基中進行發酵培養，其中，所述調控因子添加在第一培養基中和/或第二培養基中。

優選地，所述第一培養基含有：40-80g/L葡萄糖、1-5g/L KH₂PO₄、25-45g/LNa₂SO₄、2-6g/L MgSO₄、0.5-2g/L KCl、2-8g/L(NH₄)₂SO₄、15-25g/L谷氨酸鈉和2-8g/L酵母粉；