[發明專利]提高油脂中多不飽和脂肪酸含量的方法和微生物油脂的制備方法

在審

• 申請號: 202210507438.3
• 申請日: 2022-05-10
• 公開（公告）號: CN114774484A
• 公開（公告）日: 2022-07-22
• 發明（設計）人: 黃和;陳子雷;郭東升;劉孟珍;孫小曼;李穎風
• 申請（專利權）人: 南京師范大學
• 主分類號: C12P7/6463
• 分類號: C12P7/6463;C12P7/6472;C12N1/14;C12N1/38;C12R1/645
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 黃志興

1.一種提高油脂中多不飽和脂肪酸含量的方法，其特征在于，該方法包括：將產油微生物接入添加有調控因子的培養基中進行培養；

所述調控因子含有主調控劑，所述主調控劑選自丁基羥基茴香醚、二丁基羥基甲苯、特丁基對苯二酚和對羥基苯甲酸酯中的至少一種。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述對羥基苯甲酸酯選自對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸正丙酯和對羥基苯甲酸異丙酯中的至少一種。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述主調控劑為丁基羥基茴香醚和/或二丁基羥基甲苯。

4.根據權利要求1至3中任意一項所述的方法，其特征在于，所述調控因子還含有輔助調控劑，所述輔助調控劑為磷酸和/或檸檬酸。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述培養基中調控因子的含量為0.1-0.5g/L；

所述調控因子含有丁基羥基茴香醚、二丁基羥基甲苯和檸檬酸，所述丁基羥基茴香醚、二丁基羥基甲苯和檸檬酸的重量比為1-4：1-4：1。

6.根據權利要求1至3中任意一項所述的方法，其特征在于，所述培養的過程包括：將所述產油微生物接種至第一培養基中進行種子培養后得到種子液，將所述種子液以0.5-10體積％的接種量接種至第二培養基中進行發酵培養，其中，所述調控因子添加在第一培養基中和/或第二培養基中。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述第一培養基含有：40-80g/L葡萄糖、1-5g/L KH₂PO₄、25-45g/L Na₂SO₄、2-6g/L MgSO₄、0.5-2g/L KCl、2-8g/L(NH₄)₂SO₄、15-25g/L谷氨酸鈉和2-8g/L酵母粉；

所述第二培養基含有：60-100g/L葡萄糖、1-5g/L KH₂PO₄、4-12g/L Na₂SO₄、2-6g/LMgSO₄、0.1-1g/L KCl、1-5g/L(NH₄)₂SO₄、4-10g/L NaCl、0.01-0.2g/L CaCl₂、15-25g/L谷氨酸鈉、1-5g/L酵母粉和0.5-2.5g/L玉米漿干粉；

所述種子培養的條件包括：初始pH為5.5-7，轉速為150-200rpm，溫度為25-30℃，時間為20-24h；

所述發酵培養的條件包括：初始pH為5.5-7，轉速為350-550rpm，溫度為25-30℃，通氣量為3-5vvm。

8.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述產油微生物選自裂殖壺菌、高山被孢霉和微藻中的至少一種。

9.一種微生物油脂的制備方法，其特征在于，該制備方法包括：將產油微生物采用權利要求1至8中任意一項所述的方法進行培養得到培養液，將所述培養液進行破壁、提取。

10.根據權利要求9所述的制備方法，其特征在于，所述破壁采用破壁酶酶解的方式，所述破壁酶選自纖維素酶和/或蛋白酶；

相對于1L的所述培養液，所述破壁酶的用量為2-4g；

所述提取溶劑為正己烷和/或乙醇。