[發(fā)明專利]柑橘木虱泛素結(jié)合酶E2J2基因在防控柑橘黃龍病中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210490662.6
• 申請(qǐng)日: 2022-05-07
• 公開（公告）號(hào): CN114752610B
• 公開（公告）日: 2023-08-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 盧占軍;曾祥東;張金波;余海中;方瑜婕;胡威;陳瑋;黃愛軍;彭婷;姚鋒先;鄒小金;謝廉頡;汪和貴;舒佳旺;劉淑婷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 贛南師范大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/54
• 分類號(hào): C12N15/54;C12N9/10;C12N15/87;A01G13/00
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 吳波

1.柑橘木虱泛素結(jié)合酶E2J2基因在防控柑橘黃龍病中的應(yīng)用，其特征在于，所述柑橘木虱泛素結(jié)合酶E2J2基因的cDNA序列如SEQ?ID?NO.1所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述E2J2基因通過降低CLas侵染柑橘木虱發(fā)揮作用。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述柑橘木虱泛素結(jié)合酶E2J2基因編碼的蛋白氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。

4.一種降低CLas侵染柑橘木虱的方法，其特征在于，包括如下步驟：將權(quán)利要求1所述的E2J2基因在柑橘木虱中進(jìn)行基因沉默。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述基因沉默為采用RNA干擾技術(shù)進(jìn)行基因沉默。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述RNA干擾技術(shù)包括如下步驟：以柑橘木虱cDNA為模板，通過PCR技術(shù)，使用擴(kuò)增引物獲得E2J2基因的部分片段，擴(kuò)增產(chǎn)物連接入質(zhì)粒中，以質(zhì)粒為模板，用含啟動(dòng)子的引物進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物膠回收，合成dsRNA；稀釋合成的dsRNA，飼喂柑橘木虱。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述擴(kuò)增引物為

PT-F:5'ATTCAAACCACCAAGCATCT?3'，

PT-R:5'TCTTCTTGTGCTCGTCTGTCT?3'。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述含啟動(dòng)子的引物為

RNAi-F:TAATACGACTCACTATAGGGATTCAAACCACCAAGCATCT，

RNAi-R:TAATACGACTCACTATAGGGTCTTCTTGTGCTCGTCTGTCT。

9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述質(zhì)粒為pMD19-t質(zhì)粒。

10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，飼喂的柑橘木虱為4-5齡柑橘木虱若蟲。