[發明專利]一種三個基因表達水平的檢測試劑在制備卵巢癌樣本干性鑒定試劑中的應用

在審

• 申請號: 202210469839.4
• 申請日: 2022-04-30
• 公開（公告）號: CN114966027A
• 公開（公告）日: 2022-08-30
• 發明（設計）人: 郎廷元;楊牧垚;周琦;李蘊哲;楊玲玲;崔晨曦
• 申請（專利權）人: 重慶大學附屬腫瘤醫院
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/573;G01N33/68;G01N27/62;C12Q1/6886;C12Q1/6851
• 代理公司: 重慶航圖知識產權代理事務所(普通合伙) 50247
• 代理人: 王貴君

本發明公開了一種三個基因表達水平的檢測試劑在制備卵巢癌樣本干性鑒定試劑中的應用；所述三個基因分別為NOTHC2、CD9、TPO。卵巢癌樣本可作為分離培養卵巢癌干細胞的材料來源，而卵巢癌樣本的干性程度決定了分離培養卵巢癌干細胞的成功率，因此，發明可用于鑒定卵巢癌樣本干性，從而提高分離培養卵巢癌干細胞的成功率。

技術領域

本發明涉及醫學和生命科學研究和生物制備領域，具體涉及一種檢測3個基因表達水平的試劑在制備卵巢癌干細胞干性診斷試劑中的應用。

背景技術

卵巢癌是發生在女性卵巢上的惡性腫瘤，其發病率在女性生殖系統惡性腫瘤中位于第三位，在宮頸癌和子宮內膜癌之后，但卵巢癌的死亡率卻超過兩者之和，高居婦科癌癥首位.卵巢癌干細胞是卵巢癌惡性程度高的主要原因，卵巢癌干細胞指卵巢癌組織內具有干細胞特征和能力的一部分細胞。因此，研究卵巢癌干細胞和開發卵巢癌治療方法的主要工作。所以，從卵巢癌樣本中分離培養卵巢癌干細胞是進行卵巢癌研究的重要環節。另外，卵巢癌干細胞通過改造后可能成為未來的細胞工廠，因此，卵巢癌干細胞的分離提取也可能是未來生物制品生產的重要環節。

卵巢癌雖然惡性程度高，但并不是所有卵巢癌樣本都能夠成功的分離培養卵巢癌干細胞，具有一定的成功率，而該成功率會浪費技術人員的時間、財力、物力。因此，亟需一種檢測方法在技術人員操作前鑒定卵巢癌樣本的干性，以提高分離培養的成功率。是申請人在研究中發現NOTCH2、CD9、TPO不僅在人類其它干細胞中可作為標志物使用，且與卵巢癌病人的生存成反比，可用于作為卵巢癌樣本的干性標志物使用，因此，本發明提供了一種三個基因表達水平的檢測試劑在制備卵巢癌樣本干性鑒定試劑中的應用，用于提高科研和生產中分離培養卵巢癌干細胞的成功率。

發明內容

本發明的目的在于提供了一種三個基因表達水平的檢測試劑在制備卵巢癌樣本干性鑒定試劑中的應用。

為達到上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種三個基因表達水平的檢測試劑在制備卵巢癌樣本干性鑒定試劑中的應用，所述3個基因為NOTCH2、CD9、TPO。

本發明優選的，所述NOTCH2全稱為notch receptor 2，在Pubmed數據庫中的ID為4853，在人類染色體中的位置為Chromosome 1,NC_000001.11(119911553-120069662)。

本發明優選的，所述CD9全稱為CD9 molecule，在Pubmed數據庫中的ID為928，在人類染色體中的位置為Chromosome 12,NC_000012.12(6199946-6238266)。

本發明優選的，所述TPO全稱為thyroid peroxidase，在Pubmed數據庫中的ID為7173，在人類染色體中的位置為Chromosome 2,NC_000002.12(1374047-1543673)。

本發明優選的，所述表達水平指mRNA表達量和蛋白表達量。

本發明優選的，所述mRNA表達量檢測試劑所采用的方法包括探針法、qRT-PCR法和/或測序法。

更優選的，所述方法為qRT-PCR法，所述qRT-PCR法的檢測引物分別如SEQ ID NO.1與SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3與SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5與SEQ ID NO.6。

本發明優選的，所述蛋白表達檢測試劑所采用的方法包括western blot、免疫組化和/或質譜。

本發明優選的，所述卵巢癌樣本指原位卵巢癌組織、卵巢癌腹水中的卵巢癌細胞、卵巢癌腹膜上的卵巢癌組織、卵巢癌轉移于其它人體部位的卵巢癌組織。

本發明優選的，所述卵巢癌樣本干性指其分離的卵巢癌原代細胞在體外懸浮培養環境中具有強的成微球能力。