[發明專利]一種榛蘑抗氧化肽的制備方法

在審

• 申請號: 202210464362.0
• 申請日: 2022-04-29
• 公開（公告）號: CN114717286A
• 公開（公告）日: 2022-07-08
• 發明（設計）人: 李艷麗;張倩;張文博;陳瀅竹;王剛;張斯童;陳光
• 申請（專利權）人: 吉林農業大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/14;C07K1/16;A61K38/01;A61P39/06
• 代理公司: 重慶晶智匯知識產權代理事務所(普通合伙) 50229
• 代理人: 李靖

一種榛蘑抗氧化肽的制備方法是以榛蘑為原料依次進行蛋白的提取、沉淀、和水解和分離純化，所述蛋白的提取是先采用堿提，再將堿提后的殘渣進行超聲堿提，所述沉淀是依次進行等電點法和鹽析法進行沉淀，最后干燥制成榛蘑蛋白粉。本發明通過先對榛蘑進行堿提，然后再進行超聲堿提的蛋白提取方式，有效提高了榛蘑蛋白的提取率，提取率達到76.59%，在沉淀過程依次采用等電點和鹽析法結合，有效促進榛蘑蛋白的沉淀量達到66.2ug/mL，制備的抗氧化多肽對于DPPH自由基清除率達到86.37%。羥基自由基清除率達到97.53%，接近陽性對照的清除率。總還原力相當，達到0.71。

技術領域

本發明涉及抗氧化肽制備技術領域，具體涉及一種榛蘑抗氧化肽的制備方法。

背景技術

具有氧化性的自由基對機體的氧化損傷是引起人類疾病的主要原因之一，這些疾病包括衰老，冠心病，炎癥，中風，糖尿病和癌癥等，給人類健康帶來了極大的威脅。因此抗氧化劑的開發對于治療和預防這些疾病具有重要意義。

抗氧化肽作為一種安全無毒的天然抗氧化劑受到了研究者們的青睞，是當前國際食品界最熱門的研究課題之一和極具發展前景的功能因子。目前，抗氧化肽的制備主要采用蛋白酶對蛋白質中的肽鍵進行水解，從而產生具有抗氧化活性的肽類物質。但目前抗氧化肽主要來源于動物蛋白和植物蛋白，抗氧化肽大多屬于未經進一步分離純化的初級肽，使其抗氧化活性不高。

榛蘑屬于真菌界，是一種長白山地區特有的十分重要的藥食兼用真菌，含有人體必需的多種氨基酸、微量元素及維生素，最可觀的是，其蛋白質含量高達20％以上，且多為優質蛋白。現代藥理學研究表明，榛蘑多糖具有抗輻射、促進造血、抑制腫瘤生長、調節免疫、治療佝僂病、降低膽固醇、防治動脈硬化等作用。因而國內外學者多對榛蘑多糖的抗氧化性進行研究，并且證實榛蘑多糖具有一定的抗氧化活性。但是目前尚未有關于榛蘑蛋白質的提取及進一步開發利用制備抗氧化肽的報道，因而，榛蘑中蛋白的抗氧化活性如何無從得知。針對榛蘑，如何高效提取蛋白質，提取的蛋白質如何在制備成抗氧化肽的過程中顯著提高其抗氧化活性有待研究。

發明內容

本發明目的在于提供一種榛蘑抗氧化肽的制備方法。有效提高了榛蘑中蛋白質的提取率，制備的肽的抗氧化性能優異。

本發明目的通過如下技術方案實現：

一種榛蘑抗氧化肽的制備方法，其特征在于：以榛蘑為原料依次進行蛋白的提取、沉淀、水解和分離純化，所述蛋白的提取是先采用堿提，再將堿提后的殘渣進行超聲堿提，所述沉淀是依次進行等電點法和鹽析法進行沉淀，最后干燥制成榛蘑蛋白粉。

進一步，上述堿提是將榛蘑粉碎后加入蒸餾水中，攪拌均勻，加入濃度為0.1mol/L的NaOH調節溶液pH至10，在75-85℃下水浴1.5h，然后進行離心處理。

上述榛蘑和蒸餾水的料液比為1:45，離心轉速為10000rpmm，離心時間為20min。

進一步，上述超聲堿提是將堿提后的殘渣加入蒸餾水，料液比為1:45，混合均勻后用濃度為0.1mol/L的NaOH調節pH為9，然后室溫下以200W的功率進行超聲處理14-16min。

進一步，上述水解是將沉淀后的蛋白進行冷凍干燥后依次采用超聲處理和風味蛋白酶水解制備蛋白肽。

進一步，上述超聲處理是將榛蘑蛋白粉配制為質量濃度為3-4％的溶液，室溫下采用200W超聲處理15min。

進一步，所述風味蛋白酶水解是將超聲處理后的溶液采用風味蛋白酶進行水解，水解溫度為38-42℃，水解時間為2-3h。