[發明專利]一種具有抗炎抗氧化活性的憂遁草多肽及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202210458985.7
• 申請日: 2022-04-28
• 公開（公告）號: CN114989248A
• 公開（公告）日: 2022-09-02
• 發明（設計）人: 嚴芬;劉文靜;劉聰;陳曉杰;張帆
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/18;C07K1/20;C07K1/36;A61K8/64;A61Q19/00;A61Q19/08;A61K38/08;A61P29/00;A23L33/18
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 林文弘;蔡學俊

1.一種具有抗炎抗氧化活性的憂遁草多肽，其特征在于：所述憂遁草多肽的氨基酸序列為Asp-Lys-Phe-Glu-Asp-Asn-Leu-Tyr-Ser-Ala-His。

2.一種以憂遁草為原料制備權利要求1所述憂遁草多肽的方法，其特征在于：包括以下步驟：

1）將憂遁草粉碎，按料液比1：10 m/v加入蒸餾水，于25℃超聲提取35 min，隨后過濾，收集濾液；

2）將步驟1）所述濾液用堿調節劑調節至pH值為8.0，室溫下攪拌30 min后離心，收集上清液；其中，所述堿調節劑為1 mol/L NaOH；

3）將步驟2）所述上清液用酸調節劑調節至pH值為3.0，隨后離心，收集沉淀；其中，所述酸調節劑為1 mol/L HCl；

4）將步驟3）所述沉淀溶解于pH8.4的Tris-鹽酸緩沖液后用截留分子量3500 Da的透析袋在去離子水中進行透析，冷凍干燥得到憂遁草粗蛋白；

5）將步驟4）所述憂遁草粗蛋白溶解于pH8.4的Tris-鹽酸緩沖液后進行DEAE-Sepharose離子交換層析，洗脫液為含0.2~1 M NaCl的pH8.4的Tris-鹽酸緩沖液，流速1mL/min，利用層析圖譜采集分析儀獲得經DEAE-Sepharose分離純化后產物的峰圖，收集具有最高抗氧化活性的組分CNPH-Ⅲ；

6）利用反相高效液相色譜RP-HPLC對步驟5）所述CNPH-Ⅲ進行進一步分離純化，色譜柱為Thermo C18色譜柱，214 nm下檢測，進樣量為20 μL，進樣濃度為10 mg/mL，流動相流速1mL/min，流動相A為含0.1%TFA的乙腈，流動相B為含0.1%TFA的去離子水，洗脫梯度為：0-5min，5%-10%A；5-15 min，10%-50%A；15-35 min，50%-80%A，收集保留時間為3-4 min的洗脫峰CNPH-Ⅲ-2，真空冷凍干燥后保存于-80℃；

7）采用液相色譜質譜聯用儀對步驟6）所述洗脫峰CNPH-Ⅲ-2所包含的肽段進行氨基酸序列測定，對測定得到的氨基酸序列進行Fmoc固相合成，從而得所述憂遁草多肽。

3.如權利要求1所述的憂遁草多肽在制備具有抗炎功能的食品、保健品、化妝品或藥物中的應用。

4.如權利要求1所述的憂遁草多肽在制備具有抗氧化功能的食品、保健品、化妝品或藥物中的應用。