[發(fā)明專利]刺老苞粗提取物對肌肉細胞增殖作用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202210449879.2 | 申請日： | 2022-04-24 |
| 公開（公告）號： | CN114908042A | 公開（公告）日： | 2022-08-16 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 裴凌鵬;翟晉娜;孫九許 | 申請（專利權(quán)）人： | 中央民族大學(xué) |
| 主分類號： | C12N5/077 | 分類號： | C12N5/077 |
| 代理公司： | 北京貴都專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11649 | 代理人： | 李新鋒 |
| 地址： | 100086 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 刺老苞粗 提取物 肌肉 細胞 增殖 作用 | ||
1.一種刺老苞粗提取物，其特征在于，所述刺老苞粗提取物的制備方法包括以下步驟：
預(yù)先準備實驗材料及儀器；
對刺老苞根皮醇提物制備，以及對成肌細胞C2C12體外培養(yǎng)；
待C2C12細胞融合率達98%時，傳代培養(yǎng)，
傳代后的C2C12細胞接種于96孔板中，接種密度為5x103 cm2，孔板周圍一圈鋪滿PBS，以防揮發(fā)，24小時后用不同濃度刺老苞根皮醇提物分別處理C2C12細胞，并設(shè)置調(diào)零孔和空白對照孔，每組6個復(fù)孔，藥物處理24 h后，每孔加入 10μl MTT 溶液和90μl基礎(chǔ)培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)4h后，加入DMSO溶解液，搖床搖勻10min；
4）在490nm處檢測吸光度，計算細胞活力，重復(fù)進行3次獨立實驗。
2.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的一種刺老苞粗提取物，其特征在于，所述刺老苞根皮醇提物制備為稱取5g刺老苞藥材，放于研磨儀中研磨1.5 min直至樣品呈粉末狀；溶解于60 mL70% 甲醇提取液中；超聲，每30min一次，每次停頓混勻，共超聲6次；過濾，70℃旋蒸，置于冷凍干燥機中過夜干燥后備用。
3.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的一種刺老苞粗提取物，其特征在于，所述復(fù)蘇C2C12 細胞，接種于T75瓶內(nèi)，在含10%胎牛血清和1%青霉素-鏈霉素的DMEM 高糖培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)，接種密度為5 x 103 cm2。
4.置于37℃、5% CO2 恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，次日換液，其余時間每2-3天換液一次，實驗用細胞均處于對數(shù)生長期。
5.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的一種刺老苞粗提取物，其特征在于，所述3）中的刺老苞根皮醇提物濃度分別為25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml，200μg/ml。
6.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的一種刺老苞粗提取物，其特征在于，所述4）中的細胞活力計算方式為：細胞活力（%） = [A (加藥)－A (調(diào)零)]/[A (空白對照)－ A (調(diào)零)] ×100%。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于中央民族大學(xué)，未經(jīng)中央民族大學(xué)許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202210449879.2/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
