[發(fā)明專利]調(diào)控植物花粉管與柱頭識(shí)別的硫氧還蛋白及其制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210446424.5
• 申請(qǐng)日: 2022-04-26
• 公開（公告）號(hào): CN114774378A
• 公開（公告）日: 2022-07-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 代新仁;孟文靜;高新起;李全梓;朱東姿
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國林業(yè)科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): C12N9/02
• 分類號(hào): C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12Q1/6895;C12R1/19
• 代理公司: 北京八月瓜知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11543
• 代理人: 袁曉雨

1.一種調(diào)控植物花粉管與柱頭識(shí)別的硫氧還蛋白，其特征在于，所述硫氧還蛋白的序列表如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述調(diào)控植物花粉管與柱頭識(shí)別的硫氧還蛋白，其特征在于，所述硫氧還蛋白為含有序列表SEQ ID No.1或SEQ ID No.2的真核重組表達(dá)質(zhì)粒pETrx轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α獲得的重組蛋白。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述調(diào)控植物花粉管與柱頭識(shí)別的硫氧還蛋白的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

①用引物F1和R1進(jìn)行PCR擴(kuò)增cDNA，PCR產(chǎn)物純化后與載體pBS T連接，連接混合液轉(zhuǎn)化大腸桿菌，得質(zhì)粒pBSTrx；

②將質(zhì)粒pBSTrx和質(zhì)粒pET259用限制性內(nèi)切酶EcoRV酶切，酶切片段用T4 DNA連接酶連接，連接液轉(zhuǎn)化入大腸桿菌，得質(zhì)粒pETrx；

③將質(zhì)粒pETrx轉(zhuǎn)化BL21(DE3)，所得轉(zhuǎn)化子BL21(DE3)/pETrx純化所得重組蛋白，制得氨基酸序列表如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示的硫氧還蛋白。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，以擬南芥cDNA為模板。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，制備SEQ ID No.1所示硫氧還蛋白的插入突變體基因?yàn)間r1-1，制備SEQ ID No.2所示硫氧還蛋白的插入突變體基因?yàn)閚rta-1。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，gr1-1插入到GR1的第三個(gè)內(nèi)含子序列中，ntra-1插入到NTRA的第1個(gè)外顯子序列中。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，GR1的基因序列表如SEQ ID No.3所示；NTRA的基因序列表如SEQ ID No.4所示。

8.一種如權(quán)利要求1或2所述硫氧還蛋白于調(diào)控植物花粉管與柱頭識(shí)別中的應(yīng)用。