[發(fā)明專利]pH/酶雙響應(yīng)型介孔硅基藥物載體MSN@HA及其制備方法與載藥條件和靶向應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210443164.6
• 申請(qǐng)日: 2022-04-26
• 公開（公告）號(hào): CN114681626B
• 公開（公告）日: 2023-05-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 尚宏周;楊夢(mèng)然;孫曉然;喬寧;趙崢;邊思?jí)?/a>
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華北理工大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K47/69
• 分類號(hào): A61K47/69;A61K47/61;A61K31/352;A61P35/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明涉及介孔二氧化硅納米粒子藥物遞送系統(tǒng)，屬于高分子化合物的組合物領(lǐng)域，具體涉及pH/酶雙響應(yīng)型介孔硅基藥物載體MSN@HA，利用APTES對(duì)MSN進(jìn)行表面修飾引入氨基，然后通過(guò)酰胺化反應(yīng)，依次修飾CMCS和HA，制備出pH和酶雙重響應(yīng)型載體MSN@HA。當(dāng)MSN@CMCS和HA用量為20.0?mg和10.0?mg、EDC和NHS用量為50.0?mg和25.0?mg、酰胺化反應(yīng)18?h以及初始藥物濃度為500?mg/L時(shí)，載藥性能最佳，此時(shí)的載藥率為23.93%。QU@MSN@HA具有靶向性能，將其與乳腺癌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)，巨噬細(xì)胞組的細(xì)胞活性為95.79%，而乳腺癌細(xì)胞組的細(xì)胞活性僅為75.85%，兩者相差了19.94%。QU@MSN@HA具有良好的腫瘤識(shí)別能力。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及介孔二氧化硅納米粒子藥物遞送系統(tǒng)，屬于高分子化合物的組合物領(lǐng)域，具體是涉及一種pH/酶雙響應(yīng)型介孔硅基藥物載體MSN@HA及其制備方法和載藥條件和靶向應(yīng)用。

背景技術(shù)

羧甲基殼聚糖（CMCS）是殼聚糖的羧甲基化衍生物，具有良好的水溶性、抗菌活性、生物可降解和延長(zhǎng)體內(nèi)滯留時(shí)間等諸多優(yōu)勢(shì)，同時(shí)一定程度上可以抑制腫瘤細(xì)胞的遷移，在生物醫(yī)藥領(lǐng)域中被廣大學(xué)者所認(rèn)知。此外，它的分子鏈中含有大量的-NH₂和-COOH基團(tuán)，在不同的pH條件下，其電離程度變化很大；因此CMCS具有良好的pH敏感性。CD44是一類跨膜糖蛋白，研究發(fā)現(xiàn)CD44受體與腫瘤細(xì)胞的成瘤性和轉(zhuǎn)移性有關(guān)，且在多種腫瘤細(xì)胞中過(guò)表達(dá)，因此針對(duì)CD44的靶向治療一直被廣泛研究。由于CD44肽鏈的N端可以與透明質(zhì)酸（HA）特異結(jié)合，故被認(rèn)為HA的受體。此外HA可以被腫瘤細(xì)胞內(nèi)過(guò)表達(dá)的透明質(zhì)酸酶（HAase）特異性降解，因此HA在腫瘤靶向和酶響應(yīng)釋藥領(lǐng)域具有較大的應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述問題，本發(fā)明采用以下的技術(shù)方案：

pH/酶雙響應(yīng)型介孔硅基藥物載體MSN@HA，其中，利用APTES對(duì)MSN進(jìn)行表面修飾引入氨基，然后通過(guò)酰胺化反應(yīng)，依次修飾CMCS和HA，制備出pH和酶雙重響應(yīng)型載體MSN@HA。

pH/酶雙響應(yīng)型介孔硅基藥物載體MSN@HA的制備方法，其中：所述制備方法包括如下步驟：

1）MSN的制備

將1.0?g?CTAB、3.5?mL?2?M?NaOH溶液和480?mL去離子水加入到一個(gè)三口燒瓶中，在80℃下磁力攪拌30?min；然后在上述混合溶液中緩慢滴加5.0?mL的TEOS，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后繼續(xù)反應(yīng)3?h；溶液冷卻到室溫后，產(chǎn)物通過(guò)離心收集，并用無(wú)水乙醇和去離子水交替洗滌3次；最后，真空干燥12?h后得到CTAB@MSN的產(chǎn)物。

2）MSN-NH2的制備

燒瓶中加入0.5?g?MSN和50.0?mL甲苯，超聲使其充分分散，然后加入5.0?mLAPTES，在80℃下回流12?h；反應(yīng)結(jié)束后，通過(guò)離心收集產(chǎn)物，無(wú)水乙醇洗滌數(shù)次；然后將產(chǎn)物置于真空干燥箱中，25℃干燥12?h即可得MSN-NH₂；

3）MSN@CMCS的制備

稱取0.10?g的CMCS溶解于10.0?mL的去離子水中，超聲分散后加入0.25?g的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺EDC和0.15?g的N-羥基琥珀酰亞胺NHS，室溫反應(yīng)4?h,使其充分活化。然后加入0.15?g的MSN@NH₂的，繼續(xù)反應(yīng)12?h。反應(yīng)結(jié)束后，離心收集，去離子水洗滌數(shù)次后，置于真空干燥箱中干燥12?h即得MSN@CMCS。

4）MSN@HA的制備

稱取一定量的HA、EDC、NHS和50.0?mL的去離子水加入到三口燒瓶中，超聲分散后，磁力攪拌4?h，完成HA的活化。然后加入適量的MSN@CMCS，室溫反應(yīng)一段時(shí)間后，離心收集，用去離子水洗滌數(shù)次后，分散于乙醇中，干燥即得MSN@HA。