[發明專利]一種檢測BRAF基因突變的引物探針組合物、試劑盒及其使用方法和應用

在審

• 申請號: 202210426209.9
• 申請日: 2022-04-21
• 公開（公告）號: CN114634987A
• 公開（公告）日: 2022-06-17
• 發明（設計）人: 鄧微;蘭玲;茍默;周美岑;魏星
• 申請（專利權）人: 北京積水潭醫院;北京華諾奧美基因生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 成都頂峰專利事務所(普通合伙) 51224
• 代理人: 錢學宇

本發明公開了一種檢測BRAF基因突變的引物探針組合物、試劑盒及其使用方法和應用，屬于基因檢測技術領域。這種引物探針組合物包括檢測BRAF基因突變位點c.1919A＞C的實時熒光PCR引物和檢測探針，實時熒光PCR引物包括SEQ ID No.1～2所示的氨基酸序列；檢測探針包括SEQ ID No.3所示的氨基酸序列。這種試劑盒能夠快速、準確的體外檢測人全血樣本中BRAF基因NM_001374258.1轉錄本上的c.1919TA致病變異。檢測結果可用于甲狀腺乳頭狀癌、結直腸癌、黑色素瘤的輔助診斷。

技術領域

本發明屬于基因檢測技術領域，具體涉及一種檢測BRAF基因突變的引物探針組合物、試劑盒及其使用方法和應用。

背景技術

BRAF錯義變異發生于近8％人類腫瘤中，主要發生于甲狀腺乳頭狀癌、結直腸癌和黑色素瘤中。

甲狀腺癌是內分泌系統最常見的惡性腫瘤，是危害女性健康的十大癌種之一。因此，給社會、家庭和個人帶來的負擔正在不斷加重。

目前，甲狀腺細針穿刺活檢術(fine needle aspiration biopsy，FNAB)被認為是鑒別良惡性甲狀腺結節的最精確檢查。研究表明，行FNAB后經細胞病理學檢查，其中5％為惡性，60％～70％為良性，10％～30％為不確定或可疑惡性，對這些不確定或可疑惡性病例進行術后病理檢查，發現僅20％～25％為甲狀腺癌，故有75％～80％的患者接受不必要的手術。因此，如何正確處理FNAB無法鑒別的病例，是目前臨床醫師面臨的困難。

發明內容

本發明針對現有技術的缺陷，提供一種檢測BRAF基因突變的引物探針組合物、試劑盒及其使用方法和應用。這種試劑盒能夠快速、準確的體外檢測人全血樣本中BRAF基因NM_001374258.1轉錄本上的c.1919TA致病變異。檢測結果用于甲狀腺乳頭狀癌、結直腸癌、黑色素瘤的輔助診斷。

本發明通過以下技術方案實現：

第一方面，本發明提供一種檢測BRAF基因突變的引物探針組合物，所述引物探針組合物包括檢測BRAF基因突變位點c.1919A＞C的實時熒光PCR引物和檢測探針。

這種引物探針組合物可以特異性的檢測BRAF:NM_001374258.1:exon15: c.1919TA:p.Val640Glu位點突變，即檢測人全血樣本中BRAF基因 NM_001374258.1轉錄本上的c.1919TA致病變異，該變異的致病性明確。

實時熒光PCR引物包括SEQ ID No.1～2所示的核苷酸序列；

所述檢測探針包括SEQ ID No.3所示的核苷酸序列；

具體地，該引物探針組合物的序列如下：