[發明專利]擴增HIV-1 RRE全長序列的引物組合物及其應用在審
| 申請號： | 202210421097.8 | 申請日： | 2022-04-21 |
| 公開（公告）號： | CN115287372A | 公開（公告）日： | 2022-11-04 |
| 發明（設計）人： | 李林;韓婧婉;施玉婷;朱博;李韓平;劉永健;賈磊;王曉林;李敬云;李天一 | 申請（專利權）人： | 中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人： | 白艷 |
| 地址： | 100850 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 擴增 hiv rre 全長 序列 引物 組合 及其 應用 | ||
1.引物對，由引物1和引物2組成；
所述引物1的核苷酸序列為序列表的序列1或將序列1至少一個經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得的與原序列功能相同的序列；
所述引物2的核苷酸序列為序列表的序列2或將序列2至少一個經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得的與原序列功能相同的序列。
2.根據權利要求1所述的引物對，其特征在于：
所述引物對中，所述引物1和所述引物2的摩爾比為1：1。
4.權利要求1或2所述的引物對或權利要求3所述的試劑在制備試劑盒中的應用，所述試劑盒的用途為如下(a)或(b)或(c)或(d)或(e)：
(a)擴增人免疫缺陷病毒Ⅰ型RRE全長序列；
(b)鑒定或輔助鑒定人免疫缺陷病毒Ⅰ型；
(c)鑒定或輔助鑒定待檢者是否感染人免疫缺陷病毒Ⅰ型；
(d)鑒定或輔助鑒定待測樣本是否含有人免疫缺陷病毒Ⅰ型核酸；
(e)區分或輔助區分人免疫缺陷病毒Ⅰ型，和，人乙型肝炎病毒或人丙型肝炎病毒。
5.一種試劑盒，包括權利要求1或2所述的引物對或權利要求3所述的試劑；所述試劑盒的功能為如下(a)或(b)或(c)或(d)或(e)：
(a)擴增人免疫缺陷病毒Ⅰ型RRE全長序列；
(b)鑒定或輔助鑒定人免疫缺陷病毒Ⅰ型；
(c)鑒定或輔助鑒定待檢者是否感染人免疫缺陷病毒Ⅰ型；
(d)鑒定或輔助鑒定待測樣本是否含有人免疫缺陷病毒Ⅰ型核酸；
(e)區分或輔助區分人免疫缺陷病毒Ⅰ型，和，人乙型肝炎病毒或人丙型肝炎病毒。
6.權利要求5所述試劑盒的制備方法，包括將權利要求3所述成套試劑中各物質單獨包裝的步驟。
7.一種鑒定或輔助鑒定人免疫缺陷病毒Ⅰ型的方法，包括如下步驟：
(1)以待測病毒的RNA為模板，用權利要求1或2所述的引物對進行RT-PCR擴增，得到第一輪PCR擴增產物；
或，以待測病毒的DNA為模板，用權利要求1或2所述的引物對進行PCR擴增，得到第一輪PCR擴增產物；
(2)以所述第一輪PCR擴增產物為模板，用權利要求1或2所述的引物對進行PCR擴增，得到第二輪PCR擴增產物；
(3)檢測所述第二輪PCR擴增產物，若所述第二輪PCR擴增產物中具有352bp的特異DNA片段，則所述待測病毒為或候選為人免疫缺陷病毒Ⅰ型；若所述第二輪PCR擴增產物中不具有352bp的特異DNA片段，則所述待測病毒不為或候選不為人免疫缺陷病毒Ⅰ型。
8.一種鑒定或輔助鑒定待檢者是否感染人免疫缺陷病毒Ⅰ型的方法，包括如下步驟：
(1)以來源于待檢者樣本的RNA為模板，用權利要求1或2所述的引物對進行RT-PCR擴增，得到第一輪PCR擴增產物；
或，以來源于待檢者樣本的DNA為模板，用權利要求1或2所述的引物對進行PCR擴增，得到第一輪PCR擴增產物；
(2)以所述第一輪PCR擴增產物為模板，用權利要求1或2所述的引物對進行PCR擴增，得到第二輪PCR擴增產物；
(3)檢測所述第二輪PCR擴增產物，若所述第二輪PCR擴增產物中具有352bp的特異DNA片段，則所述待檢者感染或候選感染人免疫缺陷病毒Ⅰ型；若所述第二輪PCR擴增產物中不具有352bp的特異DNA片段，則所述待檢者未感染或候選未感染人免疫缺陷病毒Ⅰ型。
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