[發(fā)明專利]一種利用生物膜干涉技術(shù)快速檢測金黃色葡萄球菌的方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202210411888.2 | 申請(qǐng)日: | 2022-04-19 |
| 公開(公告)號(hào): | CN114791491A | 公開(公告)日: | 2022-07-26 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 張曉光;李爽;宋慧妍;于婉婷;張艷;路琪;劉子婕;郝瑩;白瑪措姆 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 吉林大學(xué) |
| 主分類號(hào): | G01N33/569 | 分類號(hào): | G01N33/569 |
| 代理公司: | 長春市恒譽(yù)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 22212 | 代理人: | 李榮武 |
| 地址: | 130012 吉*** | 國省代碼: | 吉林;22 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 利用 生物膜 干涉 技術(shù) 快速 檢測 金黃色 葡萄球菌 方法 | ||
1.一種利用生物膜干涉技術(shù)快速檢測金黃色葡萄球菌的方法,其特征在于:包括傳感器平衡、傳感器活化、抗體固定化、一次封閉、二次封閉、樣品檢測及結(jié)果分析,其具體步驟如下:
步驟一、傳感器平衡:將第二代氨基偶聯(lián)傳感器末端浸入純水中預(yù)濕至少10分鐘,以平衡傳感器;
步驟二、傳感器活化:將平衡后的第二代氨基偶聯(lián)傳感器浸入20mM 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽和10mM N-羥基琥珀酰亞胺混合試劑中活化300-450秒;
步驟三、抗體固定化:將活化后的第二代氨基偶聯(lián)傳感器浸入用pH 5-7的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液稀釋的濃度為12.5-100μg/mL的抗體溶液中固定化400-900秒;
步驟四、乙醇胺鹽酸鹽溶液一次封閉:將固定抗體后的第二代氨基偶聯(lián)傳感器浸入乙醇胺鹽酸鹽溶液(pH 8.5,1mol/L)中封閉300-450秒;
步驟五、牛血清白蛋白溶液二次封閉:將乙醇胺鹽酸鹽封閉后的第二代氨基偶聯(lián)傳感器浸入1%牛血清白蛋白溶液中封閉300-450秒;
步驟六、樣品檢測及結(jié)果分析:在牛血清白蛋白溶液中封閉后,將第二代氨基偶聯(lián)傳感器浸入含0.02%吐溫-20的PBS磷酸鹽緩沖溶液中平衡150-450秒,然后將其浸入樣品中進(jìn)行金黃色葡萄球菌的檢測,實(shí)時(shí)讀取結(jié)合信號(hào),根據(jù)結(jié)合信號(hào)分析檢測結(jié)果。
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