[發(fā)明專利]冬葵子及其制劑的特征圖譜及其構(gòu)建方法和含量測定方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202210410944.0
• 申請日: 2022-04-19
• 公開（公告）號: CN114814019A
• 公開（公告）日: 2022-07-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張志強(qiáng);蔣春亮;劉利娟;張美玲;姚杭琦;周婷;周永康;程立偉
• 申請（專利權(quán)）人: 北京康仁堂藥業(yè)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/74;G01N30/88
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11250
• 代理人: 周衛(wèi)賽

本發(fā)明屬于中藥檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體提供了冬葵子及其制劑的特征圖譜及其構(gòu)建方法和含量測定方法，其中，該冬葵子及其制劑特征圖譜的構(gòu)建方法，包括以下步驟，(1)冬葵子供試品溶液的制備；(2)取冬葵子供試品溶液采用高效液相色譜法檢測，填充劑采用十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動(dòng)相包括乙腈和含磷酸的水溶液，梯度洗脫，梯度洗脫程序包括：0→15分鐘→25分鐘→29分鐘→30分鐘，流動(dòng)相中乙腈的體積百分比為3％?8％→20％?22％→50％→80％→3％?8％。得到的特征圖譜峰形好，特征峰個(gè)數(shù)多，分離效果好，基線平穩(wěn)，檢測時(shí)間短，為冬葵子及其制劑的質(zhì)量檢測和控制提供依據(jù)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種冬葵子及其制劑的特征圖譜及其構(gòu)建方法和含量測定方法。

背景技術(shù)

冬葵子為錦葵科植物冬葵Malva verticillata L.的干燥成熟果實(shí)種子。夏、秋二季果實(shí)成熟時(shí)采收，干燥后除去雜質(zhì)及皮殼。生于平原、山野等處，全國各地均有分布。其性寒、味甘，具有利水通淋、滑腸、通乳之功效。此藥在臨床上可用于治療淋證和水腫，亦可用于產(chǎn)后乳汁不下以及乳房脹痛等疾病。此外，對于腸燥便秘等疾病也有一定的治療效果。冬葵子的主要化學(xué)成分有脂肪油、蛋白質(zhì)、氨基酸、有機(jī)酸等。據(jù)考證，冬葵子始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，后被眾多中醫(yī)藥著作收載，為中醫(yī)臨床常用中藥。但該藥材及其飲片未被收載于《中華人民共和國藥典》。

冬葵子配方顆粒是由冬葵子飲片經(jīng)過水提取、濃縮、干燥、制劑等步驟得到的配方顆粒，具有較強(qiáng)的臨床應(yīng)用價(jià)值，市場需求廣闊。同時(shí)關(guān)于冬葵子配方顆粒缺乏相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

目前未見有文獻(xiàn)研究報(bào)道采用高效液相色譜法建立冬葵子及其制劑的特征圖譜的方法及咖啡酸含量的方法。而采用常規(guī)的高效液相色譜法檢測冬葵子及其制劑時(shí)，出現(xiàn)分離度低、峰個(gè)數(shù)少的問題，導(dǎo)致檢測效果不佳。

發(fā)明內(nèi)容

因此，本發(fā)明的第一個(gè)目的在于解決現(xiàn)有技術(shù)中的方法檢測冬葵子及其制劑時(shí)得到的特征圖譜的分離度低、特征峰個(gè)數(shù)少的問題，提供了一種冬葵子及其制劑特征圖譜及其構(gòu)建方法和冬葵子及其制劑的含量測定方法。

具體的，本發(fā)明公開了冬葵子及其制劑特征圖譜的構(gòu)建方法，包括以下步驟，

(1)冬葵子供試品溶液的制備；

(2)取冬葵子供試品溶液采用高效液相色譜法檢測，填充劑采用十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動(dòng)相包括乙腈和含磷酸的水溶液，梯度洗脫，梯度洗脫程序包括：0→15分鐘→25分鐘→29分鐘→30分鐘，流動(dòng)相中乙腈的體積百分比為3％-8％→20％-22％→50％→80％→3％-8％。

根據(jù)本發(fā)明任一項(xiàng)所述的構(gòu)建方法，其中，步驟(1)包括：

1)取冬葵子供試品，加溶劑提取，得到提取液；

2)將提取液固液分離，取液體，即為供試品溶液。

根據(jù)本發(fā)明任一項(xiàng)所述的構(gòu)建方法，還滿足如下A-D中的任意一項(xiàng)或者多項(xiàng)：

A、步驟1)中，溶劑選自水或者30-50vt％甲醇水溶液；(vt％是指體積百分?jǐn)?shù))；

B、步驟1)中冬葵子供試品的質(zhì)量與溶劑的體積之比為0.5:20-50；質(zhì)量與體積的配比關(guān)系為g/mL。

C、步驟1)中，提取方式為回流提取或者超聲提取，提取時(shí)間為10min-5h，優(yōu)選為20-40min；

D、步驟2)中，所述固液分離為離心或者過濾。

進(jìn)一步地，步驟(2)高效液相色譜法的色譜條件還包括：檢測波長為320-324nm，流速為0.28-0.32ml/min，柱溫28-32℃，進(jìn)樣量為2-20μl。

進(jìn)一步地，步驟(2)中含磷酸的水溶液中磷酸的體積百分?jǐn)?shù)為0.05-0.2％。