[發(fā)明專利]冬葵子及其制劑的特征圖譜及其構(gòu)建方法和含量測定方法

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• 申請日: 2022-04-19
• 公開（公告）號: CN114814019A
• 公開（公告）日: 2022-07-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張志強;蔣春亮;劉利娟;張美玲;姚杭琦;周婷;周永康;程立偉
• 申請（專利權(quán)）人: 北京康仁堂藥業(yè)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/74;G01N30/88
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11250
• 代理人: 周衛(wèi)賽

1.一種冬葵子及其制劑的特征圖譜的構(gòu)建方法，其特征在于，包括以下步驟，

(1)冬葵子供試品溶液的制備；

(2)取冬葵子供試品溶液采用高效液相色譜法檢測，填充劑采用十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相包括乙腈和含磷酸的水溶液，梯度洗脫，梯度洗脫程序包括：0→15分鐘→25分鐘→29分鐘→30分鐘，流動相中乙腈的體積百分比為3％-8％→20％-22％→50％→80％→3％-8％。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟(1)包括：

1)取冬葵子供試品，加溶劑提取，得到提取液；

2)將提取液固液分離，取液體，即為供試品溶液；

優(yōu)選的，步驟(1)還滿足如下A-D中的任意一項或者多項：

A、步驟1)中，溶劑選自水或者30-50vt％甲醇水溶液；

B、步驟1)中冬葵子供試品的質(zhì)量與溶劑的體積之比為0.5g:20-50mL；

C、步驟1)中，提取方式為回流提取或者超聲提取，提取時間為10min-5h，優(yōu)選為20-40min；

D、步驟2)中，所述固液分離為離心或者過濾。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟(2)高效液相色譜法的色譜條件還包括：檢測波長為320-324nm，流速為0.28-0.32ml/min，柱溫28-32℃，進樣量為2-20μl；和/或，步驟(2)中含磷酸的水溶液中磷酸的體積百分數(shù)為0.05-0.2％；和/或，梯度洗脫程序包括：0→15分鐘→25分鐘→29分鐘→30分鐘，流動相中乙腈的體積百分比為3％→20％→50％→80％→3％。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一所述的構(gòu)建方法，其特征在于，所述的構(gòu)建方法還包括采用咖啡酸制備對照品溶液的步驟，以及按照權(quán)利要求1-3中任一所述的構(gòu)建方法中的高效液相色譜法檢測對照品溶液得到咖啡酸對照品參照圖譜的步驟；和/或，還包括采用冬葵子對照藥材經(jīng)水提制備對照藥材參照物溶液的步驟，以及按照權(quán)利要求1-3中任一所述的構(gòu)建方法中的高效液相色譜法檢測對照藥材參照物溶液得到對照藥材參照圖譜的步驟。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一所述的構(gòu)建方法，其特征在于，所述冬葵子及其制劑的特征圖譜選自如下(1)-(4)中的任意一項：

(1)其具有8個特征峰，以2號峰為參比峰，各特征峰與參比峰的相對保留時間在規(guī)定值的±10％的范圍之內(nèi)；規(guī)定值為：0.81(峰1)、1.00(峰2)、1.21(峰3)、1.39(峰4)、2.21(峰5)、2.48(峰6)、2.52(峰7)、2.80(峰8)；

(2)呈現(xiàn)8個特征峰，與咖啡酸對照品峰相對應(yīng)的峰為參比峰，各特征峰與參比峰的相對保留時間在規(guī)定值的±10％的范圍之內(nèi)，規(guī)定值為：0.81(峰1)、1.00(峰2)、1.21(峰3)、1.39(峰4)、2.21(峰5)、2.48(峰6)、2.52(峰7)、2.80(峰8)；

(3)呈現(xiàn)8個特征峰，以2號峰為參比峰，各特征峰與參比峰的相對保留時間在規(guī)定值的±10％的范圍之內(nèi)，規(guī)定值為：0.60(峰1)、1.00(峰2)、1.19(峰3)、1.58(峰4)、3.09(峰5)、3.43(峰6)、3.49(峰7)、3.90(峰8)；

(4)呈現(xiàn)8個特征峰，與咖啡酸對照品峰相對應(yīng)的峰為參比峰，各特征峰與參比峰的相對保留時間在規(guī)定值的±10％的范圍之內(nèi)，規(guī)定值為：0.60(峰1)、1.00(峰2)、1.19(峰3)、1.58(峰4)、3.09(峰5)、3.43(峰6)、3.49(峰7)、3.90(峰8)。