[發(fā)明專利]一種具有抗氧化活性的大豆分離蛋白抗氧化肽

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210394471.X
• 申請日: 2022-04-12
• 公開（公告）號: CN114671925B
• 公開（公告）日: 2023-09-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 梁桂兆;楊涵
• 申請（專利權(quán)）人: 重慶大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C12P21/06;A61P39/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明公開了一種大豆分離蛋白抗氧化肽在制備抗氧化劑中的應(yīng)用，其特征在于所述大豆分離蛋白抗氧化肽的氨基酸序列為：氨基端?PDIEHPETM?羧基端。本發(fā)明從大豆分離蛋白中提取到抗氧化肽，并通過合成同一序列肽，進一步證明該肽確實是具有抗氧化活性，將多肽作為抗氧化活性物質(zhì)添加到日常膳食中不但可以作為自由基清除劑清除人體中的有害自由基，還可以作為營養(yǎng)物質(zhì)被人體吸收利用，這對于那些營養(yǎng)缺乏、消化能力差、體弱多病者有重要的意義。

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于多肽技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種具有抗氧化活性的大豆分離蛋白抗氧化肽。

背景技術(shù)：

研究顯示，當機體氧自由基過量時會對機體造成一系列的氧化損傷，尤其是當機體處于衰老、生病或疲勞狀態(tài)時，自由基的平衡狀態(tài)就可能被破壞，對機體造成一系列氧化性損傷，嚴重時甚至可能會引發(fā)或加重細胞、組織乃至全身機體的生理紊亂與病理變化。

大豆蛋白經(jīng)水解后生成的大豆活性肽具有一定的抗氧化能力，這是因為水解使氨基酸活性基團暴露出來，因此小分子大豆肽生物活性更高。大豆肽對于抑制體內(nèi)自由基的過度積累和清除自由基保持機體自由基平衡狀態(tài)具有重要作用，從而對延緩機體衰老，減少自由基引起的疾病的發(fā)生起到一定的功效。天然抗氧化劑在醫(yī)藥、化妝品、保健品和食品與飼料添加劑等方面應(yīng)用前景廣闊，篩選具有強抗氧化活性的天然資源已成為食品科學、生物學、醫(yī)學等研究的新趨勢。而從大豆分離蛋白中獲得具有抗氧化活性的抗氧化肽序列，對其今后的開發(fā)應(yīng)用具有廣泛的意義。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的在于提供一種具有抗氧化活性的大豆分離蛋白抗氧化肽，該多肽具有抗氧化功能。

本發(fā)明是通過如下技術(shù)手段來實現(xiàn)的：一種具有抗氧化活性的大豆分離蛋白抗氧化肽，其氨基酸序列如SEQ?ID?No：1所示。

本發(fā)明通過酶法制備獲得該具有抗氧化活性的大豆分離蛋白抗氧化肽，具體制備過程如下：選大豆分離蛋白，采用堿性蛋白酶酶解提取，得酶解液，將酶解液經(jīng)分離純化，收集分子量3KD的多肽液，得到的肽液含具有抗氧化活性的大豆分離蛋白抗氧化肽。

其中堿性蛋白酶酶解提取時，酶解溫度選45-65℃，底物濃度3g/100mL-7g/100mL，酶與底物比(E/S)6-14％，pH為7-12，時間為1-6h。酶解結(jié)束后高溫滅火蛋白酶，調(diào)節(jié)pH為4.5沉淀未酶解大豆分離蛋白，離心收集上清液。

最優(yōu)條件為溫度51℃，底物濃度5.2g/100mL，E/S為12.43％，pH為12，經(jīng)堿性蛋白酶酶解4h，得到的多肽液抗氧化活性最高。

酶解液分離純化處理時優(yōu)選超濾離心管10KD和3KD進行分離純化。酶解液脫鹽處理時優(yōu)選C18柱。

經(jīng)過RP-HPLC、Q?Exactive質(zhì)譜儀進行質(zhì)譜分析，本發(fā)明制備獲得上述肽液中所含的肽段分子量為1067.4594Da，分析該肽的序列為：Pro-Asp-Ile-Glu-His-Pro-Glu-Thr-Met。

因此，本發(fā)明申請人采用人工合成上述具有抗氧化活性的大豆分離蛋白抗氧化肽，經(jīng)DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率分析發(fā)現(xiàn)，該人工合成的大豆分離蛋白抗氧化肽具有較好抗氧化性。抗氧化能力高于天然提取肽，低于谷胱甘肽。

附圖說明：

圖1是大豆分離蛋白經(jīng)酶解后分離純化的抗氧化肽質(zhì)譜圖。

具體實施方式：

實施例1

本實施例提供的具有抗氧化活性的大豆分離蛋白抗氧化肽，其氨基酸序列如SEQID?No：1所示，其通過從大豆分離蛋白中提取獲得，具體提取過程如下：