[發明專利]釀酒酵母菌AMnb091、分離培養方法及應用

有效

• 申請號: 202210388924.8
• 申請日: 2022-04-13
• 公開（公告）號: CN114806907B
• 公開（公告）日: 2023-04-18
• 發明（設計）人: 岳秋林;趙林;李昆侖;李寶君;趙晨;蘇樂;孫欣;張松
• 申請（專利權）人: 齊魯工業大學;山東筱螢生物科技有限公司;山東卓苒生物科技有限公司;笙笙向榮生物科技（山東）有限公司;山東晨彰生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/18
• 分類號: C12N1/18;C12N1/02;A23L17/00;A23L17/60;A23L31/10;C12R1/865
• 代理公司: 濟南市易拓知識產權代理事務所(普通合伙) 37325
• 代理人: 江莉莉

本發明屬于微生物培養領域，具體涉及一種可發酵制備海帶基功能性制品的釀酒酵母菌AMnb091的培養方法。所述的釀酒酵母菌AMnb091于2021年11月29日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號：CCTCC?NO:M20211499。上述的培養方法包括以下的步驟：S1：釀酒酵母菌AMnb091的分離及培養；S2：發酵海帶的釀酒酵母菌AMnb091的篩選；S3：基于釀酒酵母菌AMnb091菌株的海帶發酵；S4：發酵效果評價。本發明提供的釀酒酵母菌AMnb091，能夠利用天然海帶基質進行快速生長繁殖，且代謝物的產量增加。基于本發明菌株制備的海帶發酵制品具有優異的抗氧化和降血糖活性，其對α?葡萄糖苷酶抑制率達到70.20%，ABTS的抑制能力為78.94%。與傳統培養方法相比，高效、節能、省時、操作簡單可實現高附加值的生產。

技術領域

本發明屬于微生物培養技術領域，具體涉及一種釀酒酵母菌AMnb091，還涉及上述的釀酒酵母菌AMnb091的培養方法。

背景技術

海帶含有豐富的化學成分和生物活性物質，已被用于食品、飼料和藥物前體等許多工業領域，被喻為“天然的保健食品”。海帶中含有豐富的褐藻多糖，在功能性食品和藥品的加工應用中具有非常高的價值，此外還含有多種維生素和礦物質等。研究證明，海帶具有降血脂、降血糖、調節免疫、抗凝血、抗腫瘤、排鉛解毒和抗氧化等多種生物學功能。但我國海帶產業仍處在以傳統的粗放加工及初級加工品為主的低附加值和低效益的初級狀態，海帶產業的發展空間還遠遠沒有發掘出來。因此，創新性發展海帶加工發酵產業，研發具有營養保健價值的海帶產品，符合健康中國戰略需求，促進海帶產業鏈持續發展。

CN111154701A披露了一種一種產褐藻膠裂解酶和纖維素酶的菌株及其在發酵海帶中的應用；關于釀酒酵母應用于海帶或其它的海藻產品發酵中，鮮有文獻披露。

釀酒酵母是最早實現工業規模制造的微生物，也是如今酵母種屬中應用最廣泛的菌株。雖然其形態簡單，但其代謝產物眾多且富含多種生理活性物質，在多種領域有廣泛的應用。酵母菌主要生長在含糖的偏酸性潮濕環境中，廣泛分布于自然界，具有繁殖快，生長周期短，酶系豐富，代謝旺盛，具有利用海帶中的營養成分進行發酵的潛力。通過酵母進行發酵不僅能增加食品的風味，提高食物營養價值，還具有保健調理機體的作用。同時，酵母菌也可產生如谷胱甘肽和胞外多糖等功能性活性因子，可以提高機體抗氧化能力，提升降糖降脂等生物活性。若是能篩選到耐受力強，且酶系豐富，代謝旺盛的釀酒酵母菌，必然能為海帶的精深加工提供強有力的支持。

發明內容

為了解決上述的技術問題，本發明提供了一種能利用天然海帶進行快速生長，且具有降解海藻酸的能力的、能夠提高海帶發酵樣品降糖抗氧化能力的釀酒酵母菌AMnb091；還提供了上述菌株的培養及分離方法；

本發明所提供的釀酒酵母菌AMnb091，于2021年11月29日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏單位地址：中國武漢，武漢大學。保藏編號CCTCC?No：M20211499，分類命名為釀酒酵母菌AMnb091?Saccharomyces?cerevisiae?AMnb091。

本發明所提供的釀酒酵母菌AMnb09116s?RNA核苷酸序列為SEQ?ID?NO.1所示。

上述的發酵降解海帶的釀酒酵母菌AMnb091在YPD培養基（酵母膏胨葡萄糖）中，于30℃培養24h后，培養基呈現白色的單菌落，表面濕潤有光澤，易挑取，邊緣光滑，直徑2-3mm，菌落質地均勻，正反面和邊緣、中央部位的顏色都很均一；菌體細胞為圓形或橢圓形，直徑5-10μm。可以利用葡萄糖、麥芽糖、果糖、海藻糖和乳糖，不能利用木糖；硝酸鹽還原、類淀粉物質的生成試驗陰性；碳源同化實驗中可同化乙醇和檸檬酸,?氮源同化實驗中不能同化硝酸鹽。重氮基蘭B試驗和脲酶試驗皆為陰性。

上述的發酵海帶的釀酒酵母菌AMnb091的分離及培養方法，包括以下的步驟：

S1：釀酒酵母菌的分離及培養