[發(fā)明專(zhuān)利]一種基于ZNF334基因的檢測(cè)試劑盒及應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210375058.9
• 申請(qǐng)日: 2022-07-11
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114990213A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-09-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 向廷秀;孫冉;程兆博
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 重慶大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/6886
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 重慶市嘉允啟行專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 50243
• 代理人: 胡柯

1.一種基于ZNF334基因的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述檢測(cè)試劑盒包含ZNF334基因的甲基化檢測(cè)試劑及常規(guī)試劑；

所述常規(guī)試劑包括有聚合酶、PCR反應(yīng)緩沖液、dNTPs、去離子水、DNA修飾試劑；

所述ZNF334基因的甲基化檢測(cè)試劑包含用于檢測(cè)ZNF334基因表達(dá)的特異性引物對(duì)、用于檢測(cè)ZNF334基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)的特異性引物對(duì)、用于檢測(cè)ZNF334基因啟動(dòng)子非甲基化狀態(tài)的特異性引物對(duì)、用于提取樣本DNA的提取試劑；

所述用于檢測(cè)ZNF334基因表達(dá)的特異性引物對(duì)的序列如下：

上游引物序列為5’-GTCTCTGTGGGGTATCATGT-3’，如SEQ ID No.1所示；

下游引物序列為5’-GGCATCATCAATGTCTGGGT-3’，如SEQ ID No.2所示；

所述用于檢測(cè)ZNF334基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)的特異性引物對(duì)的序列如下：

上游引物序列為5’-TGTGGTTCGGAAAGTCGGC-3’，如SEQ ID No.3所示；

下游引物序列為5’-ACCTAACGAACCGAAAAAACG-3’，如SEQ ID No.4所示；

所述用于檢測(cè)ZNF334基因啟動(dòng)子非甲基化狀態(tài)的特異性引物對(duì)的序列如下：

上游引物序列為5’-ATTGTGGTTTGGAAAGTTGGT-3’，如SEQ ID No.5所示；

下游引物序列為5’-AAAACCTAACAAACCAAAAAAACA-3’，如SEQ ID No.6所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于ZNF334基因的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述樣本選自外周血、糞便、組織和細(xì)胞中的一種或多種。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的ZNF334基因的甲基化檢測(cè)試劑在制備用于實(shí)體腫瘤的輔助診斷、風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)、預(yù)后判斷的試劑盒中的應(yīng)用。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的ZNF334基因的甲基化檢測(cè)試劑在制備適用于以下檢測(cè)方法的試劑盒中的應(yīng)用，所述檢測(cè)方法具體步驟包括：

S1、提取待測(cè)個(gè)體的樣本DNA；

S2、利用甲基化檢測(cè)試劑檢測(cè)樣本DNA中的ZNF334基因的啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)；

S3、根據(jù)S2檢測(cè)得到的甲基化狀態(tài)，對(duì)待測(cè)個(gè)體的實(shí)體腫瘤情況進(jìn)行評(píng)判。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的ZNF334基因的甲基化檢測(cè)試劑在制備用于實(shí)體腫瘤的輔助診斷、風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)、預(yù)后判斷的試劑盒中的應(yīng)用，其特征在于，所述實(shí)體腫瘤包括有結(jié)腸癌和乳腺癌。