[發明專利]一種ω-轉氨酶突變體及其在制備西塞卡納藥物中間體的應用

在審

• 申請號: 202210371099.0
• 申請日: 2022-04-08
• 公開（公告）號: CN114645030A
• 公開（公告）日: 2022-06-21
• 發明（設計）人: 黃俊;曹佳仁;邱帥;梅樂和;呂常江;樊芳芳;胡升;趙偉睿
• 申請（專利權）人: 浙江科技學院
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/00;C12R1/19
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 沈金龍

1.一種ω-轉氨酶突變體，其特征在于，由來自土曲霉(Aspergillus terreus)的ω-轉氨酶突變所得，野生型ω-轉氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述ω-轉氨酶突變體的突變位點為：V149A/R128L/L182V/D224K、V149A/R128L/L182F/D224K或V149A/L182F/L187F/D224K中的一種。

2.編碼如權利要求1所述ω-轉氨酶突變體的基因。

3.如權利要求2所述的基因，其特征在于，突變位點為V149A/R128L/L182V/D224K、V149A/R128L/L182F/D224K或V149A/L182F/L187F/D224K的ω-轉氨酶突變體的基因序列分別如SEQ ID No.3-5所示。

4.包含如權利要求2所述基因的重組表達質粒。

5.包含如權利要求4所述重組表達質粒的基因工程菌。

6.如權利要求1所述ω-轉氨酶突變體、權利要求2所述基因或權利要求5所述基因工程菌在催化1-乙酰基萘生成西塞卡納藥物中間體(R)-1-(1-萘基)乙胺中的應用。

7.一種催化1-乙酰基萘生成西塞卡納藥物中間體(R)-1-(1-萘基)乙胺的方法，其特征在于，1-乙酰基萘作為氨基受體，1-(R)-苯乙胺作為氨基供體，使用權利要求1所述ω-轉氨酶突變體或權利要求7所述基因工程菌進行催化反應，將來自氨基供體的氨基轉至氨基受體，反應得到西塞卡納藥物中間體(R)-1-(1-萘基)乙胺。

8.如權利要7所述的方法，其特征在于，催化反應時，所述1-乙酰基萘的摩爾濃度為10-50mM，所述1-(R)-苯乙胺的摩爾濃度為10-50mM。

9.如權利要7所述的方法，其特征在于，催化反應時，催化反應的溫度為30℃；催化反應的時間為0.5-24h。