[發明專利]一株內生球毛殼菌MG2及其在防治蘋果樹腐爛病的應用有效
| 申請號: | 202210362681.0 | 申請日: | 2022-04-08 |
| 公開(公告)號: | CN114774287B | 公開(公告)日: | 2023-06-27 |
| 發明(設計)人: | 馮浩;渠非;黃麗麗;賀艷婷;蘇曉州 | 申請(專利權)人: | 西北農林科技大學 |
| 主分類號: | C12N1/14 | 分類號: | C12N1/14;C12Q1/04;C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/6869;A01N63/30;A01P3/00;C12R1/645 |
| 代理公司: | 西安長和專利代理有限公司 61227 | 代理人: | 黃偉洪 |
| 地址: | 712100 陜*** | 國省代碼: | 陜西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一株內生球毛殼菌 mg2 及其 防治 蘋果樹 腐爛 應用 | ||
本發明屬于植物病害生物防治技術領域,公開了一株內生球毛殼菌MG2及其在防治蘋果樹腐爛病的應用,所述內生球毛殼菌MG2已保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心,保藏號為:CGMCCNo.40070;所述內生球毛殼菌MG2是從健康木瓜海棠樹皮中分離得到,經過鑒定確定為球毛殼菌,置于4℃小斜面保存。實驗結果表明,本發明的內生球毛殼菌抑制了腐爛病菌的孢子萌發,發酵液具有良好的熱穩定性;球毛殼菌發酵液具有良好的熱穩定性和紫外線穩定性,可以應用于田間;球毛殼菌及其發酵液對蘋果離體枝條均有一定的保護和治療效果,但其保護作用優于治療作用,為后期生產球毛殼菌預防保護制劑奠定基礎。
技術領域
本發明屬于植物病害生物防治技術領域,尤其涉及一株內生球毛殼菌MG2及其在防治蘋果樹腐爛病的應用。
背景技術
我國是世界第一蘋果生產國,蘋果產業是推進鄉村振興、鞏固脫貧攻堅成果的重要支柱產業。然而,由真菌蘋果黑腐皮殼(Valsamali)引起的蘋果樹腐爛病卻一直威脅著該產業的健康發展。腐爛病是蘋果最具毀滅性的枝干病害,常造成枝枯樹死,嚴重時甚至毀園,帶來巨大的經濟損失。目前,對于蘋果樹腐爛病的防治主要還依賴化學藥劑,由于化學殺菌劑特別是內吸性殺菌劑長期而廣泛的使用,導致病原菌抗藥性問題日益突出。亟需通過綜合防治尤其是與生物防治相結合,來克服其抗藥性的問題,從而對蘋果樹腐爛病進行有效控制。但是,目前生物防治真菌資源多數尚處于研究與開發的初始階段,遠遠滿足不了生產上的實際要求。加之果品農藥殘留、生態環境污染等問題層出不窮,不利于綠色食品的健康發展。因此大力開發生防微生物資源產品已勢在必行。
通過上述分析,現有技術存在的問題及缺陷為:
(1)由于化學殺菌劑特別是內吸性殺菌劑長期而廣泛的使用,導致蘋果樹腐爛病菌抗藥性增強、生態環境污染和農藥殘留等問題嚴重制約著綠色食品的健康發展。
(2)目前生物防治真菌資源多數尚處于研究與開發的初始階段,尤其缺乏特異性強、防治效果好的生防產品,遠遠滿足不了生產上蘋果樹腐爛病防治的實際要求。
發明內容
針對現有技術存在的問題,本發明提供了一株內生球毛殼菌MG2及其在防治蘋果樹腐爛病的應用。
本發明是這樣實現的,一株內生球毛殼菌MG2,所述內生球毛殼菌MG2已保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心,保藏號為:CGMCCNo.40070。
進一步,所述內生球毛殼菌MG2是從健康木瓜海棠(ChaenomelescathayensisSchneid)樹皮中分離得到,經過鑒定確定為球毛殼菌,置于4℃小斜面保存。
本發明的另一目的在于提供一種實施所述的內生球毛殼菌MG2的內生球毛殼菌MG2的鑒定方法,所述內生球毛殼菌MG2的鑒定方法包括以下步驟:
步驟一,形態學觀察:進行重新活化培養后的拮抗菌株MG2特征的觀察;
步驟二,分子生物學鑒定:PCR擴增后構建多基因系統發育進化樹。
進一步,所述步驟一中的形態學觀察包括:
將平板對峙篩選得到的拮抗菌株MG2重新活化接于PDA培養基上,25℃培養箱中黑暗培養7d,觀察生長速度、菌落顏色、形狀以及閉囊殼形態特征。
其中,所述PDA培養基的制備方法為:稱取去皮馬鈴薯200g,切成小塊雙蒸水煮沸至可戳散,四層紗布過濾煮沸液至1L的量杯,加入20g葡萄糖和15g瓊脂攪拌均勻后雙蒸水定容至1L,封口121℃高壓滅菌20min待用。
進一步,所述步驟二中的分子生物學鑒定包括:
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