[發明專利]一種黃酮醇3-O-半乳糖苷生物合成相關的半乳糖基轉移酶及其應用有效
| 申請號： | 202210340158.8 | 申請日： | 2022-04-01 |
| 公開（公告）號： | CN115109762B | 公開（公告）日： | 2023-09-22 |
| 發明（設計）人： | 李鮮;郭妍;曹運琳;任傳宏;解林峰;張波;陳昆松 | 申請（專利權）人： | 浙江大學 |
| 主分類號： | C12N9/10 | 分類號： | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/60;C12R1/19 |
| 代理公司： | 杭州堅果知識產權代理事務所(普通合伙) 33366 | 代理人： | 劉曉 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 黃酮 半乳糖 生物 合成 相關 轉移酶 及其 應用 | ||
1.一種半乳糖基轉移酶在黃酮醇3-O-半乳糖苷制備中的應用，其中，所述半乳糖基轉移酶至少具有下列1)～2)特征之一：
1)所述半乳糖基轉移酶編碼基因的核苷酸序列為SEQ:NO?.1所示；
2)所述半乳糖基轉移酶的氨基酸序列為SEQ:NO?.2所示。
2.一種基因表達載體在黃酮醇3-O-半乳糖苷制備中的應用，其中，所述載體含有半乳糖基轉移酶編碼基因，所述半乳糖基轉移酶編碼基因的核苷酸序列為SEQ:NO?.1。
3.一種轉基因細胞系或宿主菌在黃酮醇3-O-半乳糖苷制備中的應用，其中所述細胞系或宿主菌含有半乳糖基轉移酶或包含半乳糖基轉移酶編碼基因的表達載體，其中，所述半乳糖基轉移酶至少具有下列1）～2）特征之一：
1）所述半乳糖基轉移酶編碼基因的核苷酸序列為SEQ:NO?.1所示；
2）所述半乳糖基轉移酶的氨基酸序列為SEQ:NO?.2所示。
4.權利要求1-3任一項所述的應用，其中，所述的黃酮醇3-O-半乳糖苷選自槲皮素3-O-半乳糖苷或者山奈酚3-O-半乳糖苷。
5.一種黃酮醇3-O-半乳糖苷的制備方法，其特征在于，所述的制備方法選自以下的任意一種：
（1）向半乳糖基轉移酶直接提供底物黃酮醇和UDP-半乳糖；
（2）向轉基因細胞系或宿主菌中導入包含半乳糖基轉移酶編碼基因的表達載體；向轉基因細胞系或宿主菌提供黃酮醇和UDP-半乳糖；
（3）通過包含半乳糖基轉移酶編碼基因的表達載體或者含有半乳糖基轉移酶的轉基因細胞系或宿主菌獲得重組半乳糖基轉移酶；向重組半乳糖基轉移酶提供底物黃酮醇和UDP-半乳糖；
其中所述半乳糖基轉移酶至少具有下列1）～2）特征之一：
1）所述半乳糖基轉移酶編碼基因的核苷酸序列為SEQ:NO?.1所示；
2）所述半乳糖基轉移酶的氨基酸序列為SEQ:NO?.2所示。
6.一種槲皮素3-O-半乳糖苷的制備方法，其特征在于，所述的制備方法選自以下的任意一種：
（1）向半乳糖基轉移酶直接提供底物槲皮素和UDP-半乳糖；
（2）向轉基因細胞系或宿主菌中導入包含半乳糖基轉移酶編碼基因的表達載體；向轉基因細胞系或宿主菌提供槲皮素和UDP-半乳糖；
（3）通過包含半乳糖基轉移酶編碼基因的表達載體或者含有半乳糖基轉移酶的轉基因細胞系或宿主菌獲得重組半乳糖基轉移酶；向重組半乳糖基轉移酶提供底物槲皮素和UDP-半乳糖；
其中所述半乳糖基轉移酶至少具有下列1)～2)特征之一：
1)所述半乳糖基轉移酶編碼基因的核苷酸序列為SEQ:NO?.1所示；
2)所述半乳糖基轉移酶的氨基酸序列為SEQ:NO?.2所示。
7.一種山奈酚3-O-半乳糖苷的制備方法，其特征在于，所述的制備方法選自以下的任意一種：
（1）向半乳糖基轉移酶直接提供底物山奈酚和UDP-半乳糖；
（2）向轉基因細胞系或宿主菌中導入包含半乳糖基轉移酶編碼基因的表達載體；向轉基因細胞系或宿主菌提供山奈酚和UDP-半乳糖；
（3）通過包含半乳糖基轉移酶編碼基因的表達載體或者含有半乳糖基轉移酶的轉基因細胞系或宿主菌獲得重組半乳糖基轉移酶；向重組半乳糖基轉移酶提供底物山奈酚和UDP-半乳糖；
其中所述半乳糖基轉移酶至少具有下列1)～2)特征之一：
1)所述半乳糖基轉移酶編碼基因的核苷酸序列為SEQ:NO?.1所示；
2)所述半乳糖基轉移酶的氨基酸序列為SEQ:NO?.2所示。
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