[發明專利]一種構建鹽吳茱萸高效液相特征圖譜的方法及其應用

有效

• 申請號: 202210338604.1
• 申請日: 2022-04-01
• 公開（公告）號: CN114755328B
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 周厚成;周靖惟;張開元;梅國榮;胡昌江;羅瑩;朱彥西;陳蓉;黃美華;徐紅應;余榮平;黃宇;孫紀元
• 申請（專利權）人: 四川新綠色藥業科技發展有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 楊威

本發明提供了一種構建鹽吳茱萸高效液相特征圖譜的方法，包括以下步驟：分別精密吸取參照物溶液、供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，建立高效液相特征圖譜；所述測定的色譜柱為Agilent?TC?C18，以乙腈為流動相A，以0.05wt％～0.15wt％的磷酸水溶液為流動相B，進行梯度洗脫，檢測波長為250nm～260nm，理論板數按綠原酸峰計算不低于3000。與現有技術相比，本發明建立了高效液相特征圖譜方法用于吳茱萸藥材、鹽吳茱萸飲片、鹽吳茱萸提取物及鹽吳茱萸配方顆粒的檢測，不僅可用于吳茱萸藥材、鹽吳茱萸飲片的質量控制，還可用于吳茱萸藥材及其炮制品的基原鑒定，并且穩定性好、精密度高、重現性好、便捷且易于掌握。

技術領域

本發明涉及醫藥技術領域，更具體地說，是涉及一種構建鹽吳茱萸高效液相特征圖譜的方法及其應用。

背景技術

鹽吳茱萸為蕓香科植物吳茱萸Euodia?rutaecarpa(Juss.)Benth、疏毛吳茱萸Euodia?rutaecarpa(Juss.)Benth.var.bodinieri(Dode)Huang或石虎Euodia?rutaecarpa(Juss.)Benth?var.offi?cinalis(Dode)Huang干燥近成熟果實的加工炮制品。鹽吳茱萸味辛、苦、咸，具有散寒止痛，降逆止嘔，助陽止瀉的功效。用于寒疝腹痛，厥陰頭痛，寒濕腳氣，經行腹痛，嘔吐吞酸，脘腹脹痛，五更泄瀉等癥狀^[3]。鹽炙品引藥下行，增強療效；緩和辛燥之性，增強滋陰降火作用^[4]。其化學成分類型較多，包括生物堿、苦味素、揮發油、黃酮、酚酸及其衍生物、蒽醌等類成分，其中生物堿、苦味素類含量較高，為其主要活性成分^[5]。現代藥效學研究表明，鹽吳茱萸具有抗炎、鎮痛、抗菌、強心、舒張血管、增加組織器官血流量、保護胃黏膜、抗腫瘤等作用，且廣泛用于復發性口瘡、慢性腎功能衰竭、梅尼埃病等疾病的治療^[6-8]。

《中國藥典》2000版^[9]中吳茱萸的炮制品僅收錄了甘草制吳茱萸和除去雜質的吳茱萸，《全國中藥炮制規范》中收載了鹽吳茱萸^[10]，文獻報道對炮制品鹽吳茱萸及其相關制劑的質量控制方法進行研究較少^[11-13]，且并未對其特征圖譜進行深入研究。

發明內容

有鑒于此，本發明旨在構建一種高效液相特征圖譜方法，全面反映鹽吳茱萸及其相關制劑的質量水平，對鹽吳茱萸飲片、鹽吳茱萸提取物、鹽吳茱萸配方顆粒及其相關制劑的質量評價、吳茱萸藥材基原鑒別及資源開發利用提供依據。

本發明提供了一種構建鹽吳茱萸高效液相特征圖譜的方法，包括以下步驟：

分別精密吸取參照物溶液、供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，建立高效液相特征圖譜；

所述測定的色譜柱為Agilent?TC-C18，以乙腈為流動相A，以0.05wt％～0.15wt％的磷酸水溶液為流動相B，進行梯度洗脫，檢測波長為250nm～260nm，理論板數按綠原酸峰計算不低于3000。

優選的，所述參照物溶液的制備方法具體為：

取吳茱萸對照藥材0.1g～1g，置具塞錐形瓶中，加水10ml～100ml加熱回流提取10min～60min，取出，放冷，搖勻，離心，取上清液揮干，殘渣加1ml～10ml50wt％～90wt％乙醇水溶液超聲處理10min～30min，取出，放冷，搖勻，濾過，取續濾液，作為對照藥材的參照物溶液；

取吳茱萸堿、吳茱萸次堿、去氫吳茱萸堿、金絲桃苷、綠原酸、新綠原酸、隱綠原酸、咖啡酸對照品，精密稱定，加50wt％～90wt％乙醇水溶液制成每1ml各含40μg～60μg的溶液，作為對照品參照物溶液。

優選的，所述供試品溶液的制備方法具體為：