[發明專利]一種構建鹽吳茱萸高效液相特征圖譜的方法及其應用

有效

• 申請號: 202210338604.1
• 申請日: 2022-04-01
• 公開（公告）號: CN114755328B
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 周厚成;周靖惟;張開元;梅國榮;胡昌江;羅瑩;朱彥西;陳蓉;黃美華;徐紅應;余榮平;黃宇;孫紀元
• 申請（專利權）人: 四川新綠色藥業科技發展有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 楊威

1.一種構建鹽吳茱萸高效液相特征圖譜的方法，其特征在于，包括以下步驟：

分別精密吸取參照物溶液、供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，建立高效液相特征圖譜；

所述測定的色譜柱為Agilent?TC-C18，以乙腈為流動相A，以0.05wt%~0.15wt%的磷酸水溶液為流動相B，進行梯度洗脫，檢測波長為250nm~260nm，理論板數按綠原酸峰計算不低于3000；

所述參照物溶液的制備方法具體為：

取吳茱萸對照藥材0.1g~1g，置具塞錐形瓶中，加水10ml~100ml加熱回流提取10min~60min，取出，放冷，搖勻，離心，取上清液揮干，殘渣加1ml~10ml?50wt%~90wt%乙醇水溶液超聲處理10min~30min，取出，放冷，搖勻，濾過，取續濾液，作為對照藥材的參照物溶液；

取吳茱萸堿、吳茱萸次堿、去氫吳茱萸堿、金絲桃苷、綠原酸、新綠原酸、隱綠原酸、咖啡酸對照品，精密稱定，加50wt%~90wt%乙醇水溶液制成每1ml各含40μg~60μg的溶液，作為對照品參照物溶液；

所述梯度洗脫的過程具體為：

0~10min，流動相A：8wt%，流動相B：92wt%→89wt%；

10min~25min，流動相A：8wt%→15wt%，流動相B：89wt%→84wt%；

25min~40min，流動相A：15wt%→25wt%，流動相B：80wt%→75wt%；

40min~48min，流動相A：25wt%→32wt%，流動相B：75wt%→52wt%；

48min~60min，流動相A：32wt%→60wt%，流動相B：52wt%→30wt%；

60min~70min，流動相A：60wt%→95wt%，流動相B：30wt%→5wt%；

70min~80min，流動相A：95wt%→100wt%，流動相B：5wt%→0wt%。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述供試品溶液的制備方法具體為：

取供試品0.1g~1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加50wt%~90wt%乙醇水溶液5ml~15ml，密塞，超聲處理10min~60min，放冷，搖勻，濾過，取續濾液，作為供試品溶液。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述參照物溶液和供試品溶液的體積比為（2~8）：1；所述供試品溶液的用量為1μl~5μl。

4.一種吳茱萸藥材、鹽吳茱萸飲片、鹽吳茱萸提取物及鹽吳茱萸配方顆粒的檢測方法，其特征在于，應用權利要求1~3任一項所述的構建鹽吳茱萸高效液相特征圖譜的方法實現。

5.根據權利要求4所述的檢測方法，其特征在于，用于鹽吳茱萸提取物及鹽吳茱萸配方顆粒的特征圖譜檢測，有15個共有特征峰，8個指標成分，用于吳茱萸藥材及鹽吳茱萸飲片的特征圖譜檢測，有20個共有特征峰，8個指標成分。

6.一種吳茱萸藥材、鹽吳茱萸飲片、鹽吳茱萸提取物及鹽吳茱萸配方顆粒的質量控制方法，其特征在于，應用權利要求1~3任一項所述的構建鹽吳茱萸高效液相特征圖譜的方法實現。

7.一種吳茱萸藥材及其炮制品的基原鑒定方法，其特征在于，應用權利要求1~3任一項所述的構建鹽吳茱萸高效液相特征圖譜的方法實現。

8.根據權利要求7所述的基原鑒定方法，其特征在于，進行所述基原鑒定時，峰a為石虎的特有峰，峰b為石虎和吳茱萸的共有峰，若供試品色譜峰出現峰a和峰b，則為石虎；只出現峰b，則為吳茱萸；均不出現峰a和峰b，則為疏毛吳茱萸。