[發(fā)明專利]小分子抑制劑ML385在抑制腫瘤細(xì)胞PD-L1方面的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210336542.0
• 申請(qǐng)日: 2022-04-01
• 公開（公告）號(hào): CN114588153A
• 公開（公告）日: 2022-06-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 范義輝;史淙霖;鄭雯;毛仁芳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南通大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K31/427
• 分類號(hào): A61K31/427;A61K39/395;A61P35/00;A61P15/14;C12Q1/6886;C12Q1/686
• 代理公司: 北京科家知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11427
• 代理人: 曹振中

1.一種小分子抑制劑ML385在抑制腫瘤細(xì)胞PD-L1方面的應(yīng)用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其特征在于，所述ML385抑制劑抑制腫瘤細(xì)胞中PD-L1的功能，激活T細(xì)胞的抗腫瘤免疫功能。

3.一種小分子抑制劑ML385在抑制腫瘤細(xì)胞PD-L1和PD-L2方面的應(yīng)用。

4.根據(jù)權(quán)利要求3的應(yīng)用，其特征在于，所述ML385抑制劑通過(guò)抑制NRF2和MAF的結(jié)合，破壞NRF2識(shí)別PD-L1L2-SE的核心位點(diǎn)，從而抑制PD-L1和PD-L2的表達(dá)。

5.小分子抑制劑ML385在抑制LPS誘導(dǎo)的PD-L1和PD-L2表達(dá)方面的應(yīng)用。

6.一種殺傷腫瘤細(xì)胞的藥物，其特征在于，包括小分子抑制劑ML385。

7.根據(jù)權(quán)利要求6的殺傷腫瘤細(xì)胞的藥物，其特征在于，所述藥物還包括抗PD-L1抗體或抗PD-L2抗體。

8.小分子抑制劑ML385抑制在制備治療乳腺癌藥物方面的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物包括小分子抑制劑ML385，所述小分子抑制劑ML385抑制超增強(qiáng)子及LPS誘導(dǎo)的PD-L1。

9.小分子抑制劑ML385抑制PDL1的檢測(cè)方法，其特征在于，包括以下過(guò)程：

（1）對(duì)PD-L1L2-SE進(jìn)行了精細(xì)分析，發(fā)現(xiàn)一段核心區(qū)域（hg19: Chr9: 5498950-5499663）；設(shè)計(jì)了所有sgRNA，共22個(gè)sgRNA；通過(guò)分別建立穩(wěn)定sgRNA細(xì)胞系，sgRNA-22號(hào)對(duì)PD-L1的表達(dá)影響最大；用定量RT-PCR進(jìn)一步檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)sgRNA-22穩(wěn)定細(xì)胞系能顯著下調(diào)PD-L1和PD-L2的表達(dá)；

（2）對(duì)sgRNA-22的細(xì)胞系進(jìn)行了DNA測(cè)序，測(cè)序發(fā)現(xiàn)在sg-RNA-22位置有TGT的缺失；缺失TGT堿基后，該序列將無(wú)法被NRF2/MAF復(fù)合物識(shí)別；

（3）小分子抑制劑ML385處理SUM159和MDA-MB-231后，PD-L1的蛋白水平顯著下降；進(jìn)一步用定量RT-PCR進(jìn)行測(cè)試，小分子抑制劑ML385處理細(xì)胞后，PD-L1和PD-L2的mRNA水平顯著下降，表明小分子抑制劑ML385抑制超增強(qiáng)子PD-L1L2-SE的功能，進(jìn)而抑制PD-L1和PD-L2的表達(dá)；

（4）誘導(dǎo)NRF2/MAF活化的條件，進(jìn)一步激活PD-L1L2-SE超增強(qiáng)子，增強(qiáng)PD-L1的表達(dá)；LPS刺激激活NRF2的表達(dá)和PD-L1的表達(dá)；ML385處理抑制LPS誘導(dǎo)的PD-L1高表達(dá)；驗(yàn)證通過(guò)ML385處理可以顯著下調(diào)超增強(qiáng)子PD-L1L2-SE誘導(dǎo)的PD-L1高表達(dá)和免疫逃逸；ML385處理抑制LPS誘導(dǎo)的PD-L1高表達(dá)；NRF2的抑制劑ML385可以通過(guò)抑制超增強(qiáng)子及LPS誘導(dǎo)的PD-L1。