[發(fā)明專(zhuān)利]敲除Pth11-rg1基因在提高淡紫紫孢菌對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)致死效果的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210328437.2
• 申請(qǐng)日: 2022-03-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114703202B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-05-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姬紅麗;謝家廉;楊芳;徐幸;于文娟
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/31
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/31;C12N1/15;C12Q1/686;C12Q1/06;C12Q1/04;A01K67/033;C12R1/79
• 代理公司: 成都欣圣知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 51292
• 代理人: 王海文

本申請(qǐng)?zhí)峁┝藘蓚€(gè)與稻瘟病跨膜蛋白編碼基因pth11同源的淡紫紫孢菌基因Pth11?rg1和Pth11?rg2，利用基因敲除技術(shù)將上述Pth11基因進(jìn)行功能屏蔽，獲得了ΔPth11?rg1、ΔPth11?rg2基因工程菌株，并利用上述基因工程菌株對(duì)淡紫紫孢菌Pth11?rg1、Pth11?rg2基因的功能進(jìn)行驗(yàn)證，從而能夠較為高效地進(jìn)行基因水平上的功能的初步鑒定。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請(qǐng)涉及病蟲(chóng)害生物防治領(lǐng)域，尤其是涉及敲除 Pth11-rg1基因在提高淡紫紫孢菌對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)致死效果的應(yīng)用。

背景技術(shù)

植物寄生性線蟲(chóng)為害水稻、小麥、玉米、大豆、蔬菜、煙草、果樹(shù)等多種作物以及林木，據(jù)估計(jì)每年在全世界大約造成800億美元的損失（Jones?et?al?2013）。淡紫紫孢菌，原名淡紫擬青霉菌（ Purpureocillium?lilacinum，原名 Paecilomyces?lilacinus）是一種重要的線蟲(chóng)卵寄生菌，能寄生孢囊線蟲(chóng)、根結(jié)線蟲(chóng)和腎型線蟲(chóng)在內(nèi)的多種植物病原線蟲(chóng)。該菌分布廣泛，適應(yīng)力強(qiáng)，是國(guó)內(nèi)外線蟲(chóng)生物防治重要的利用和研究對(duì)象。

在國(guó)內(nèi)外的市面上已有淡紫紫孢菌制劑商品，用于防治根結(jié)線蟲(chóng)、孢囊線蟲(chóng)，并有著良好的效果。然而，目前尚未對(duì)淡紫紫孢菌侵入線蟲(chóng)卵的過(guò)程進(jìn)行深入研究，缺乏基因水平上的功能闡述。

發(fā)明內(nèi)容

本申請(qǐng)的目的在于提供兩淡紫紫孢菌 Pth11基因—— Pth11-rg1和 Pth11-rg2，上述基因與稻瘟病跨膜蛋白編碼基因 pth11同源，與淡紫紫孢菌寄生線蟲(chóng)蟲(chóng)卵過(guò)程相關(guān)。進(jìn)一步地，本申請(qǐng)還利用基因敲除技術(shù)將上述 Pth11基因進(jìn)行功能屏蔽，獲得了 ΔPth11-rg1、 ΔPth11-rg2基因工程菌株，并利用上述基因工程菌株對(duì)淡紫紫孢菌 Pth11-rg1、 Pth11-rg2基因的功能進(jìn)行驗(yàn)證，從而能夠較為高效地進(jìn)行基因水平上的功能的初步鑒定。

本申請(qǐng)的目的之一在于提供兩淡紫紫孢菌 Pth11基因—— Pth11-rg1和 Pth11-rg2，其cDNA序列如SEQ?ID?NO.1、SEQ?ID?NO.2所示。

上述兩基因由稻瘟菌跨膜蛋白編碼基因 pth11作為指導(dǎo)，利用淡紫紫孢菌轉(zhuǎn)錄組和基因組測(cè)序數(shù)據(jù)篩選而得，再通過(guò)基因組PCR擴(kuò)增得到其基因組全長(zhǎng)，并對(duì)其基因結(jié)構(gòu)進(jìn)行預(yù)測(cè)，其對(duì)應(yīng)的核酸序列分別如SEQ?ID?NO.3、SEQ?ID?NO.4所示。