[發明專利]miR-483-5p海綿體及在制備抑制2型糖尿病β細胞去分化的藥物中的用途在審
| 申請號： | 202210322787.8 | 申請日： | 2022-03-29 |
| 公開（公告）號： | CN114854740A | 公開（公告）日： | 2022-08-05 |
| 發明（設計）人： | 張亞琴;韓曉;牛凡弟;吳濤;王力冉;吳倜珺;孫瞳;吳婧文 | 申請（專利權）人： | 南京醫科大學 |
| 主分類號： | C12N15/113 | 分類號： | C12N15/113;C12N15/864;A61K31/7088;A61P3/10 |
| 代理公司： | 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 冒艷 |
| 地址： | 211166 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | mir 483 海綿 制備 抑制 糖尿病 細胞 分化 藥物 中的 用途 | ||
1.一種miR-483-5p海綿體，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。
2.權利要求1所述的miR-483-5p海綿體在制備抑制2型糖尿病β細胞去分化的藥物中的用途。
3.根據權利要求2所述的用途，其特征在于：所述miR-483-5p海綿體與表達載體有效連接。
4.根據權利要求3所述的用途，其特征在于：所述有效連接是指miR-483-5p海綿體與表達載體的連接使所產生的核酸構建體能在細胞或動物體內轉錄miR-483-5p海綿體。
5.根據權利要求3所述的用途，其特征在于：所述表達載體為腺相關病毒表達質粒。
6.根據權利要求5所述的用途，其特征在于：所述腺相關病毒表達質粒為pHBAAV-CMV-MCS-T2Am-zsgreen。
7.根據權利要求4所述的用途，其特征在于：所述核酸構建體是通過在miR-483-5p海綿體序列的兩端加上與表達載體相配的酶切位點，合成正向序列和反向序列，以與表達載體有效連接。
8.根據權利要求4所述的用途，其特征在于：所述核酸構建體的制備方法，包括如下步驟：
(1)選用腺相關病毒載體pHBAAV-CMV-MCS-T2Am-zsgreen；感受態細胞選用大腸桿菌菌株DH5α；抗性：Amp；
(2)針對目的基因合成miR-483-5p海綿體，然后構建腺相關病毒表達載體，擴增腺相關病毒載體；在293T細胞內進行腺相關病毒載體的大量包裝，進行腺相關病毒的濃縮及純化，最后對腺相關病毒滴度測定。
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