[發(fā)明專利]一種同時(shí)檢測(cè)血清樣本中氧化三甲胺類物質(zhì)的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210321729.3
• 申請(qǐng)日: 2022-03-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN115047087A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-09-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 麗麗;陳宇;唐堂
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 武漢邁特維爾生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/72
• 代理公司: 北京中知星原知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11868
• 代理人: 馬如

1.一種檢測(cè)樣本中氧化三甲胺的方法；所述的方法是利用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)的方法檢測(cè)血清樣本中的氧化三甲胺；在一個(gè)具體的實(shí)施例中，所述的方法包括：

1)血清樣本中氧化三甲胺的提取；

2)設(shè)置LC-MS/MS的參數(shù)條件；

3)數(shù)據(jù)處理：根據(jù)氧化三甲胺保留時(shí)間和離子對(duì)信息，對(duì)每種物質(zhì)在樣本中檢測(cè)到的質(zhì)譜峰進(jìn)行校正，樣本質(zhì)控分析以及獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述的樣本提取方法為：取血清樣本，按照樣本：溶劑為1:5的體積比加入70％的甲醇，混合，吸取上述混合后溶液的1/2到離心管中，-20℃靜置后，低溫離心，取上清過(guò)96孔蛋白沉淀板，備用。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，所述的LC-MS/MS檢測(cè)所用的數(shù)據(jù)采集儀器系統(tǒng)包括超高效液相色譜(WatersHClass)和串聯(lián)質(zhì)譜MS/MS(Applied Biosystems6500QuadrupoleTrap)；其中

色譜柱：ACQUITY UPLC BEH Amide柱；

流動(dòng)相A：超純水(10mM乙酸銨，0.3％氨水)；

流動(dòng)相B：90％乙腈/水(V/V)；

洗針液：50％乙腈(超聲脫氣10min)；

柱溫：30℃；流速：0.4mL/min；進(jìn)樣量：2μL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中LC-MS/MS的洗脫梯度：0-1.2min A/B為5:95(V/V)，8min A/B為30:70(V/V)，9.0-11min A/B為50:50(V/V)，11.1-15min A/B為5:95(V/V)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述的質(zhì)譜條件為：

Ion Mode	ESI+	Curtain Gas	20
Nebulizer Cμrrent	3	Temperatμre	350
Ion Source Gas1	20	Ion Source Gas2	0
Collision Gas	Medium	Scan type	MRM
Entrance Potential	10	Collision Cell Exit Potential	13
MRM detection window	120	Target Scan Time	0.3s

。