[發明專利]用于小細胞肺癌NSE檢測的電化學適體傳感器的制備方法及應用在審
| 申請號： | 202210303134.5 | 申請日： | 2022-03-25 |
| 公開（公告）號： | CN114594258A | 公開（公告）日： | 2022-06-07 |
| 發明（設計）人： | 白麗娟;吳麗萍;李悅媛;孫劭晨;王露露;李慧珍 | 申請（專利權）人： | 重慶醫科大學 |
| 主分類號： | G01N33/573 | 分類號： | G01N33/573;G01N33/574;G01N33/531;G01N27/00 |
| 代理公司： | 重慶立川知識產權代理事務所(普通合伙) 50285 | 代理人： | 李啟林 |
| 地址： | 400016 重慶*** | 國省代碼： | 重慶;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 細胞 肺癌 nse 檢測 電化學 傳感器 制備 方法 應用 | ||
1.一種用于肺癌NSE檢測的電化學適體傳感器，其特征在于：通過信號探針和基底材料構建用于肺癌NSE檢測的電化學適體傳感器；
所述構建用于肺癌NSE檢測的電化學適體傳感器的方法為：將基底材料ZnO@PDDA/N-CNTs溶液滴加到玻碳電極表面上，室溫干燥；然后將干燥的電極沉積金60S，并滴加100μg/mL鏈霉親和素于4℃孵育12h；將電極用DEPC水沖洗干凈，滴加BIO-NBAI，于4℃孵育2h；接著用DEPC水沖洗干凈，滴加1％牛血清蛋白(BSA)于室溫孵育0.5-1h；然后又用DEPC水沖洗干凈，滴加NSE于電極表面，于25-45℃下孵育0.5-3h；最后用DEPC水沖洗干凈，滴加Ni6MnO8@AB/PtNPs/NBA II信號探針溶液于室溫孵育2h，得到用于NSE檢測的電化學適體傳感器；
所述信號探針溶液的制備方法為：Ni6MnO8@AB粉末分散在超純水中，加入1％K2PtCl6攪拌15min后再緩慢滴加4mg/mLNaBH4制得Ni6MnO8@AB/PtNPs分散液，向Ni6MnO8@AB/PtNPs分散液中加入NSE結合適體II(NBA II)，冰浴攪拌12h，離心，水洗，將沉淀物重新分散于超純水中，得到Ni6MnO8@AB/PtNPs/NBA II的信號探針溶液；所述Ni6MnO8@AB復合納米材料的制備方法為：將Mn(CH3COO)2·4H2O和Ni(NO3)2·6H2O溶于超純水中，加入HMTA混合均勻，再加入活化的AB，于高壓反應釜中80℃反應12h，自然冷卻至室溫，水洗至中性，60℃烘干；然后將烘干的產物在300℃下煅燒2h，升溫速率為2℃min-1，得到Ni6MnO8@AB復合納米材料；
所述基底材料分散液的制備方法為：氮摻雜碳納米管(N-CNTs)溶于無水乙醇溶液中，超聲分散均勻，在室溫下攪拌，然后加入ZnO@PDDA溶液，室溫下磁力攪拌24h，離心、洗滌，再將沉淀物分散在超純水中，得到ZnO@PDDA/N-CNTs的基底材料分散液。
2.如權利要求1所述的傳感器，其特征在于，活化AB的步驟為：將AB分散在濃硝酸中，然后80℃加熱條件下攪拌24h，收集濃硝酸處理后的AB，在冰水中冷卻，水洗至中性，60℃烘干即得。
3.如權利要求1所述的傳感器，其特征在于：所述ZnO@PDDA溶液的制備方法為稱取的氧化鋅(ZnO)溶于無水乙醇溶液中，超聲分散均勻,在室溫下攪拌，然后滴加1wt％聚二烯丙基二甲基氯化銨(PDDA)，磁力攪拌24h得到分散均勻的ZnO@PDDA溶液。
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