[發明專利]基于Cardipy染料的溶酶體靶向熒光探針及其制備方法和應用有效
| 申請號： | 202210295703.6 | 申請日： | 2022-03-24 |
| 公開（公告）號： | CN114539268B | 公開（公告）日： | 2022-12-09 |
| 發明（設計）人： | 孫遠強;孫朋娟;李朝輝 | 申請（專利權）人： | 鄭州大學 |
| 主分類號： | C07D487/16 | 分類號： | C07D487/16;C09K11/06;G01N21/64 |
| 代理公司： | 鄭州優盾知識產權代理有限公司 41125 | 代理人： | 冉珊敏 |
| 地址： | 450001 河南*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基于 cardipy 染料 溶酶體 靶向 熒光 探針 及其 制備 方法 應用 | ||
1.基于Cardipy染料的溶酶體靶向熒光探針，其結構式如下：
。
2.權利要求1所述的溶酶體靶向熒光探針的制備方法，其特征在于，步驟為：
（1）將2,4-二甲基吡咯和氫氧化鉀溶解于干燥的DMSO中，在氮氣流保護下室溫攪拌后加入二氯甲烷在繼續攪拌得到白色固體即化合物2；
（2）向化合物2的甲苯溶液中加入三光氣所得混合溶液回流5 h，經快速柱色譜分離混合物得白色固體3；
（3）將化合物3的無水THF溶液加入到鄰甲基溴苯和正丁基鋰的混合溶液中反應，反應溶液經純化后得化合物4；
（4）化合物4在冰醋酸與哌啶催化下進一步與對羥基苯甲醛反應，反應結束后除去有機溶劑后將剩余的物質溶解在HCl和THF的1:1混合物中進行陰離子交換，所得混合溶液的有機層經萃取、干燥蒸發、純化得到紅色固體。
3.根據權利要求2的制備方法，其特征在于：所述步驟（1）中2,4-二甲基吡咯、氫氧化鉀和二氯甲烷的物質的量比為2:3:1.5。
4.根據權利要求3的制備方法，其特征在于：所述步驟（2）中化合物2和三光氣的物質的量比為5:2。
5.根據權利要求4的制備方法，其特征在于：所述步驟（3）中化合物3、鄰甲基溴苯和正丁基鋰的物質的量比為0.3:1:1。
6.根據權利要求5的制備方法，其特征在于：所述步驟（4）中化合物4和對羥基苯甲醛的物質的量比為1:3。
7.權利要求1所述的熒光探針在非疾病診斷目的的可視化檢測溶酶體中的應用。
8.權利要求1所述的熒光探針在非疾病診斷目的的監測活細胞中溶酶體內pH波動中的應用。
9.根據權利要求7或8的應用，其特征在于，步驟為：將2 μM探針和LysoTrackerTM DeepRed共同孵育待測細胞15-20min，通過激光共聚焦成像觀測探針在待測細胞中的分布。
10.根據權利要求7或8的應用，其特征在于，步驟為：將2 μM探針與待測細胞共同孵育15-20min，通過激光共聚焦成像觀測探針熒光強度的變化。
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