[發明專利]一種抗腫瘤樹突狀細胞及其制備方法、表達載體及應用有效
| 申請號： | 202210295417.X | 申請日： | 2022-03-23 |
| 公開（公告）號： | CN114621929B | 公開（公告）日： | 2023-05-30 |
| 發明（設計）人： | 李冬貝;魏旭東;李海軍;范瑞華;米瑞華;陳琳;程誠 | 申請（專利權）人： | 河南省腫瘤醫院 |
| 主分類號： | C12N5/10 | 分類號： | C12N5/10;C12N5/0784;C12N15/867;C12N15/12;A61K39/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京睿智保誠專利代理事務所(普通合伙) 11732 | 代理人： | 周新楣 |
| 地址： | 450003 河*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 腫瘤 樹突 細胞 及其 制備 方法 表達 載體 應用 | ||
1.一種抗腫瘤樹突狀細胞，其特征在于，所述抗腫瘤樹突狀細胞為經synNotch受體改造的樹突狀細胞，synNotch受體包括PD-1胞外域，Notch跨膜域和轉錄調節模塊Gal4-VP64，所述synNotch受體的氨基酸序列如SEQ?ID?NO：1所示，其編碼基因的核苷酸序列如SEQ?IDNO：2所示；所述抗腫瘤樹突狀細胞內引入轉錄調控模塊GAL4-UAS-TRAF6，所述轉錄調控模塊的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：3所示；所述經synNotch受體改造的樹突狀細胞為DC2.4。
2.一種如權利要求1所述的抗腫瘤樹突狀細胞的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)分別合成synNotch受體編碼基因以及轉錄調控模塊編碼基因；
(2)將synNotch受體編碼基因克隆到慢病毒載體上，獲得synNotch受體重組慢病毒載體；將轉錄調控模塊編碼基因克隆到慢病毒載體上，獲得轉錄調控重組慢病毒載體；
(3)將synNotch受體重組慢病毒載體、轉錄調控重組慢病毒載體進行慢病毒包裝，獲得慢病毒；
(4)將所述慢病毒感染樹突狀細胞。
3.一種用于改造樹突狀細胞的表達載體，其特征在于，包括synNotch受體表達載體和轉錄調控表達載體，所述synNotch受體表達載體上攜帶有synNotch受體編碼基因，所述synNotch受體編碼基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：2所示，所述轉錄調控表達載體上攜帶有轉錄調控元件編碼基因，所述轉錄調控元件編碼基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：3所示。
4.如權利要求3所述的表達載體，其特征在于，synNotch受體表達載體的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：4所示。
5.如權利要求3或4所述的表達載體，其特征在于，所述轉錄調控表達載體的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：5所示。
6.一種如權利要求1所述的抗腫瘤樹突狀細胞或如權利要求3～5中任一項所述的表達載體在制備抗PD-L1陽性的腫瘤藥物方面的應用。
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