[發(fā)明專(zhuān)利]一種土瓶草組織培養(yǎng)方法及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210290261.6
• 申請(qǐng)日: 2022-03-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114557280B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-11-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊燕;唐宗英;李雪娟;鄒明宇;李勇;許志成
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 云南林業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院;云南華衡檢測(cè)技術(shù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 昆明盈正知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 53208
• 代理人: 徐洪剛

1.一種土瓶草組織培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟包括：

（1）外植體消毒：選取土瓶幼嫩普通葉作為外植體，在超凈臺(tái)上進(jìn)行消毒；

（2）叢生芽誘導(dǎo)：將消毒好的外植體，接種在叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，在溫度為25±2℃，光照強(qiáng)度2000～3000Lux，日照光12h的光暗交替環(huán)境下培養(yǎng)60～90天；

所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0.05～0.1mg/L+2,4-D 0.02～0.05mg/L+2-IP0.5～0.8mg/L+活性炭0.7g/L；

（3）叢生芽增殖：將誘導(dǎo)出的叢生芽，切成單芽，接種在叢生芽增殖培養(yǎng)基上，在溫度為25±2℃，光照強(qiáng)度2000～3000Lux，日照光12h的光暗交替環(huán)境下培養(yǎng)40～60天；

所述叢生芽增殖培養(yǎng)基為改良MS+NAA 0.1～0.15mg/L+KT 4.0～5.0mg/L+BR 0.05～0.08mg/L+活性炭 0.5g/L；

（4）叢生芽生根：將通過(guò)誘導(dǎo)或增殖獲得的叢生芽，接種在生根培養(yǎng)基上,在溫度為25±2℃，光照強(qiáng)度2000～3000 Lux，日照光12h的光暗交替環(huán)境下培養(yǎng)30～40天；

所述叢生芽生根培養(yǎng)基為1/2改良MS+NAA 0.4～0.6mg/L+IBA 0.8～1.2mg/L+GA3 0.2～0.4mg/L+活性炭 0.5g/L；

所述改良改良MS培養(yǎng)基為在原MS配方的基礎(chǔ)上，將其中的磷酸二氫鉀調(diào)整為1600mg/L，硫酸鎂調(diào)整為160mg/L，氯化鈣調(diào)整為180mg/L，其余元素不變。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，步驟（1）中，所述幼嫩普通葉為植株未形成“瓶”的葉片。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，步驟（1）中，所述消毒方法為先后用75%酒精溶液消毒15～20s，自來(lái)水漂洗2～3次；用含有2～3滴吐溫-80的0.08%升汞溶液消毒5～6min。

4.根據(jù)權(quán)利要求1～3任一項(xiàng)所述組織培養(yǎng)方法在土瓶草繁育中的應(yīng)用。