[發(fā)明專利]一種基于查爾酮的溶酶體熒光探針及其制備方法與應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210259082.6
• 申請(qǐng)日: 2022-03-16
• 公開（公告）號(hào): CN114478435A
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王超;馮夢(mèng)祥;代方方;趙敏;王晨
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 陜西科技大學(xué)
• 主分類號(hào): C07D295/088
• 分類號(hào): C07D295/088;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 61200
• 代理人: 王艾華

本發(fā)明公開了一種查爾酮的溶酶體熒光探針及其制備方法與應(yīng)用，本發(fā)明屬于有機(jī)分子熒光探針技術(shù)領(lǐng)域，將2’?羥基查爾酮HCA和1,3?二溴丙烷加入有機(jī)溶劑中反應(yīng)，經(jīng)硅膠柱色譜分離獲得中間體Br?HCA，將中間體Br?HCA和嗎啉加入有機(jī)溶劑中反應(yīng)，經(jīng)硅膠柱色譜分離獲得溶酶體熒光探針Lyso?HCA。該熒光探針制備方法簡(jiǎn)單、快速、成本低，制得的熒光探針背景干擾低、檢測(cè)靈敏度高，應(yīng)用于細(xì)胞熒光成像的激發(fā)能力強(qiáng)，該探針熒光對(duì)酸堿性環(huán)境穩(wěn)定性好，對(duì)溶酶體熒光成像的特異性好。該探針為細(xì)胞溶酶體熒光成像研究提供了具有廣闊應(yīng)用前景的工具。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于有機(jī)分子熒光探針技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種基于查爾酮的溶酶體熒光探針及其制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)

溶酶體是一種存在于真核細(xì)胞中的重要細(xì)胞器，含有多種酸性水解酶，是細(xì)胞分解各種外源和內(nèi)源大分子物質(zhì)的主要場(chǎng)所，還參與細(xì)胞自噬、分化和凋亡等過程，另外還與多種遺傳疾病和腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。因此，監(jiān)測(cè)活細(xì)胞中溶酶體的變化具有重大意義。熒光成像法是研究細(xì)胞中溶酶體形貌、分布及動(dòng)態(tài)變化過程的有力工具，它具有特異性好、實(shí)時(shí)、可視化等眾多優(yōu)點(diǎn)。一些商品化的有機(jī)分子類熒光探針已廣泛應(yīng)用細(xì)胞內(nèi)溶酶體的靶向熒光成像，但目前很多商品化溶酶體熒光探針的結(jié)構(gòu)復(fù)雜，制備過程繁瑣，成本高。因此，仍需要進(jìn)一步開發(fā)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、低成本、高性能的溶酶體熒光探針。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于解決現(xiàn)有技術(shù)中的問題，提供一種基于查爾酮的溶酶體熒光探針及其制備方法與應(yīng)用。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：

一種基于查爾酮的溶酶體熒光探針，所述探針結(jié)構(gòu)式如下所示：

一種基于查爾酮的溶酶體熒光探針的制備方法，包括如下步驟：

步驟1)將2’-羥基查爾酮HCA和1,3-二溴丙烷加入有機(jī)溶劑中混合均勻，在堿性條件下加熱回流攪拌，過濾除去固體殘?jiān)瑴p壓蒸餾除去溶劑，粗產(chǎn)品經(jīng)硅膠柱色譜分離獲得中間體Br-HCA；

步驟2)將中間體Br-HCA和嗎啉加入有機(jī)溶劑中混合均勻，在堿性條件下加熱回流，減壓蒸餾除去溶劑，粗產(chǎn)品經(jīng)硅膠柱色譜分離獲得溶酶體熒光探針Lyso-HCA。

進(jìn)一步的，步驟1)中，反應(yīng)原料HCA與1,3-二溴丙烷的摩爾比為1:2～10。

進(jìn)一步的，步驟1)中，所述有機(jī)溶劑使用N,N-二甲基甲酰胺、四氫呋喃或乙腈，反應(yīng)原料HCA、1,3-二溴丙烷和有機(jī)溶劑的摩爾比為1:2～10:60～1000。

進(jìn)一步的，步驟2)中，所述有機(jī)溶劑使用N,N-二甲基甲酰胺、四氫呋喃或乙腈，中間體Br-HCA、嗎啉和有機(jī)溶劑的摩爾比為1:2～10:60～1000。

進(jìn)一步的，步驟1)中，所述堿性條件使用無(wú)機(jī)堿為氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銫或氫化鈉，且反應(yīng)原料HCA、1,3-二溴丙烷和堿的摩爾比為1:2～10:1～10。

進(jìn)一步的，步驟2)中，所述堿性條件使用無(wú)機(jī)堿為氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銫或氫化鈉，且反應(yīng)原料Br-HCA、嗎啉和堿的摩爾比為1:1～5:1～10。

進(jìn)一步的，步驟1)和步驟2)中，反應(yīng)溫度為60-120℃，反應(yīng)時(shí)間為4～24h。

基于查爾酮的溶酶體熒光探針在細(xì)胞溶酶體靶向熒光成像中的應(yīng)用。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：