[發(fā)明專利]醋五靈脂或其提取物的高效液相特征圖譜及其構(gòu)建方法和用途

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210252571.9
• 申請(qǐng)日: 2022-03-09
• 公開（公告）號(hào): CN114660211A
• 公開（公告）日: 2022-06-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王彥帥;丁浩強(qiáng);劉岱琳;張靜澤;張志強(qiáng);周永康;高揚(yáng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津現(xiàn)代創(chuàng)新中藥科技有限公司;北京康仁堂藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/06
• 分類號(hào): G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明提供了一種構(gòu)建醋五靈脂或其提取物的高效液相特征圖譜的方法，其包括：制得醋五靈脂供試品溶液，并以原兒茶酸作為對(duì)照品，制得對(duì)照品溶液；對(duì)所述醋五靈脂供試品溶液和所述對(duì)照品溶液進(jìn)行高效液相色譜檢測(cè)；其中，所述高效液相色譜檢測(cè)的條件包括：在260 nm的波長(zhǎng)下，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱的填充劑，以乙腈為流動(dòng)相A，以甲酸水溶液為流動(dòng)相B，采用梯度洗脫的方式洗脫。本發(fā)明還提供了根據(jù)上述方法構(gòu)建的特征圖譜及其用途。本發(fā)明通過(guò)高效液相色譜有效構(gòu)建了特征圖譜，為更全面、更準(zhǔn)確地鑒定醋五靈脂或其提取物、實(shí)現(xiàn)其中各成分的分析與含量檢測(cè)提供了高效的保障，其準(zhǔn)確度好、精密度高、專屬性強(qiáng)且穩(wěn)定性好。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥分析和檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。具體地，本發(fā)明涉及醋五靈脂或其提取物的高效液相特征圖譜及其構(gòu)建方法和用途。

背景技術(shù)

五靈脂為鼯鼠科動(dòng)物復(fù)齒鼯鼠Trogopterus xanthipes Milne-Edwards的干燥糞便。始載于宋《開寶本草》：“五靈脂出北地，寒號(hào)蟲糞也”，性溫，味咸、甘，歸肝經(jīng)。

五靈脂作為臨床上常用的糞便類中藥，其活血化瘀，通經(jīng)止痛療效顯著，有婦科要藥之稱。然而由于其來(lái)源的特殊性，化學(xué)成分的復(fù)雜性，研究相對(duì)較薄弱，文獻(xiàn)收載數(shù)目較少。查閱文獻(xiàn)，五靈脂主要成分有酚酸類、黃酮類、三萜類和核苷類等，臨床主要用于治療痛經(jīng)、血瘀經(jīng)閉、胃潰瘍、蛇蟲咬傷等疾病，現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)表明五靈脂還具有抗炎、清除自由基、抗動(dòng)脈粥樣硬化、治療慢性心力衰竭等作用。

醋五靈脂是五靈脂經(jīng)醋制加工而來(lái)的炮制加工品，研究文獻(xiàn)資料較少，現(xiàn)有的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)《中國(guó)藥典》1997年版和1990年版僅記載其來(lái)源和性狀，《北京市中藥飲片炮制規(guī)范》2008年版收載其功能與主治為：活血，散瘀，止痛。用于胸脅、脘腹疼痛，痛經(jīng)，經(jīng)閉，產(chǎn)后血瘀疼痛，跌撲損傷，蛇蟲咬傷。李婭琦等對(duì)五靈脂的抗凝血活性進(jìn)行探究，選擇五靈脂凝血酶時(shí)間測(cè)定實(shí)驗(yàn)進(jìn)行抗凝血譜效關(guān)系研究，結(jié)果表明，包括原兒茶酸在內(nèi)的13個(gè)色譜峰(其余未識(shí)別)，與凝血酶時(shí)間測(cè)定實(shí)驗(yàn)藥效的關(guān)聯(lián)度較大。除此之外，還有文獻(xiàn)報(bào)道五靈脂中含有穗花杉雙黃酮和扁柏雙黃酮，有抑制血栓形成及抗病毒作用，由于穗花杉雙黃酮和扁柏雙黃酮極性較小，不易溶于水，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室預(yù)實(shí)驗(yàn)測(cè)定，其在配方顆粒中含量較小，為10ppm級(jí)，無(wú)質(zhì)控意義，原兒茶酸具有抑制血小板聚集及抑菌的活性，是五靈脂中主要活性成分之一，故選擇原兒茶酸作為含量測(cè)定指標(biāo)成分。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一目的在于提供一種醋五靈脂高效液相特征圖譜、其構(gòu)建方法。該方法以原兒茶酸為特征成分，通過(guò)高效液相色譜有效地構(gòu)建了特征圖譜，為更全面、更準(zhǔn)確地實(shí)現(xiàn)醋五靈脂中各成分的分析與含量檢測(cè)提供了高效的保障。

本發(fā)明的上述第一目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一方面，本發(fā)明提供了一種構(gòu)建醋五靈脂高效液相特征圖譜的方法，其包括：

(a)制得醋五靈脂供試品溶液，并以原兒茶酸作為對(duì)照品，制得對(duì)照品溶液；

(b)對(duì)所述醋五靈脂供試品溶液和所述對(duì)照品溶液進(jìn)行高效液相色譜檢測(cè)；

其中，所述高效液相色譜檢測(cè)的條件包括：

在260nm的波長(zhǎng)下，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱的填充劑，以乙腈為流動(dòng)相A，以甲酸水溶液為流動(dòng)相B，采用梯度洗脫的方式洗脫。

優(yōu)選地，在步驟(a)中，制得醋五靈脂供試品溶液的方法包括：使醋五靈脂供試品溶解于甲醇水溶液中并定量，經(jīng)超聲提取、過(guò)濾后制得。

優(yōu)選地，所述醋五靈脂供試品溶液的濃度為10mg/mL～50mg/mL。在本發(fā)明中，所述醋五靈脂供試品溶液的濃度可以選擇例如10mg/mL、11mg/mL、12mg/mL、13mg/mL、14mg/mL、15mg/mL、20mg/mL、25mg/mL、30mg/mL、35mg/mL、40mg/mL、45mg/mL、50mg/mL、以及以上點(diǎn)值中任意兩個(gè)組成的范圍內(nèi)的任意點(diǎn)值。