[發(fā)明專利]醋五靈脂或其提取物的高效液相特征圖譜及其構建方法和用途

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• 申請日: 2022-03-09
• 公開（公告）號: CN114660211A
• 公開（公告）日: 2022-06-24
• 發(fā)明（設計）人: 王彥帥;丁浩強;劉岱琳;張靜澤;張志強;周永康;高揚
• 申請（專利權）人: 天津現(xiàn)代創(chuàng)新中藥科技有限公司;北京康仁堂藥業(yè)有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種構建醋五靈脂或其提取物的高效液相特征圖譜的方法，其包括：

（a）制得醋五靈脂供試品溶液，并以原兒茶酸作為對照品，制得對照品溶液；

（b）對所述醋五靈脂供試品溶液和所述對照品溶液進行高效液相色譜檢測；

其中，所述高效液相色譜檢測的條件包括：

在260 nm的波長下，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱的填充劑，以乙腈為流動相A，以甲酸水溶液為流動相B，采用梯度洗脫的方式洗脫。

2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中，步驟（a）中，制得所述醋五靈脂供試品溶液的方法包括：

使醋五靈脂供試品溶解于甲醇水溶液中并定量，經(jīng)超聲提取、過濾后獲得；

優(yōu)選地，所述醋五靈脂供試品溶液的濃度為10 mg/mL~50 mg/mL；更優(yōu)選地為20 mg/mL；

優(yōu)選地，所述原兒茶酸對照品溶液的濃度為5 μg/mL~500 μg/mL；

更優(yōu)選地為40 μg/mL。

3.優(yōu)選地，所述超聲提取在390 W~520 W的功率和30 kHz~50 kHz的頻率下進行20 min~40 min；更優(yōu)選地為30 min。

4.優(yōu)選地，所述甲醇水溶液的體積濃度為0%~100%；更優(yōu)選地為100%。

5.根據(jù)權利要求1或2所述的方法，其中，所述甲酸水溶液的體積濃度為0.08%~0.15%，優(yōu)選地為0.1%。

6.根據(jù)權利要求1至3中任一項所述的方法，其中，以所述流動相A和所述流動相B的體積分數(shù)計，所述梯度洗脫的程序包括：

0 min~9 min，以8%流動相A-92%流動相B洗脫；

9 min~11 min，以8%~13%流動相A-92%~87%流動相B洗脫；

11 min~20 min，以13%~15%流動相A-87%~85%流動相B洗脫；

20 min~25 min，以15%~19%流動相A-85%~81%流動相B洗脫；

25 min~35 min，以19%~23%流動相A-81%~77%流動相B洗脫；

35min~45 min，以23%~35%流動相A-77%~65%流動相B洗脫。

7. 根據(jù)權利要求1至4中任一項所述的方法，其中，流動相的流速為0.8mL/min~1.2mL/min，優(yōu)選地為1.0 mL/min；色譜柱的柱溫為25°C~35°C，優(yōu)選地為30°C；

優(yōu)選地，所述供試品溶液和所述對照品溶液的進樣量為8 μL~12 μL，更優(yōu)選地為10 μL。

8.一種根據(jù)權利要求1至5中任一項所述的構建醋五靈脂或其提取物的高效液相特征圖譜的方法獲得的醋五靈脂或其提取物的高效液相特征圖譜。

9.根據(jù)權利要求6所述的醋五靈脂或其提取物的高效液相特征圖譜，其包含5個特征峰，相對于特征峰1(S)的保留時間，各特征峰的相對保留時間分別在以下規(guī)定值的±10%范圍內(nèi)：1.12（特征峰2）、2.52（特征峰3）、3.10（特征峰4）、以及3.68（特征峰5）。

10.一種鑒定醋五靈脂或其提取物的方法，其包括：獲得待鑒定的供試品的高效液相色譜譜圖，并且將所述供試品的高效液相色譜譜圖與根據(jù)權利要求6或7所述的醋五靈脂或其提取物的高效液相特征圖譜對照。

11.一種檢測醋五靈脂或其提取物中有關物質含量的方法，其包括：

（a）制得供試品溶液，并以原兒茶酸作為對照品，制得對照品溶液；

（b）對所述供試品溶液和所述對照品溶液進行高效液相色譜檢測；

其中，所述高效液相色譜檢測的條件包括：

在260 nm的波長下，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱的填充劑，以乙腈為流動相A，以甲酸水溶液為流動相B，采用梯度洗脫的方式洗脫；

其他條件如權利要求2至5中所定義。

12.根據(jù)權利要求9所述的方法，其中，所述有關物質包括原兒茶酸、槲皮苷、穗花衫雙黃酮中的至少一種；

優(yōu)選地，所述原兒茶酸的檢測波長為260 nm。