[發(fā)明專利]一種利用羅非魚皮制備的抗氧化肽及制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210237803.3
• 申請日: 2022-03-10
• 公開（公告）號: CN114805490B
• 公開（公告）日: 2023-05-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周慧;馬月云;武龍;汪秋寬;任丹丹;何云海;劉舒;李想
• 申請（專利權(quán)）人: 大連海洋大學
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;A61P39/06
• 代理公司: 大連非凡專利事務(wù)所 21220
• 代理人: 閃紅霞

本發(fā)明公開一種利用羅非魚皮制備的抗氧化肽及制備方法，抗氧化肽的氨基酸序列為Gly?Asn?Ala?Gly?Pro?Thr?Gly?Pro?Ala?Gly?Pro?Leu。制備方法依次按照如下步驟進行：將羅非魚皮清洗攪碎后加入堿性蛋白酶進行酶解，得到羅非魚皮酶解液，所述酶解條件是pH8.0~12.0、溫度35~65℃、加酶量為總質(zhì)量的1~6%、料液比為1：20~80g/ml、酶解時間為5.0~15.0h；將羅非魚皮酶解液沸水浴滅酶并快速冷卻，4℃條件下10000r/min離心10~20min，取上清液；將上清液進行超濾膜過濾，得分子量≤1000的組分；利用反相高效液相色譜儀對分子量≤1000的組分進行分離，得到分子量為1007Da，氨基酸序列為Gly?Asn?Ala?Gly?Pro?Thr?Gly?Pro?Ala?Gly?Pro?Leu的羅非魚皮抗氧化肽。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種利用羅非魚皮制備的抗氧化肽及制備方法。

背景技術(shù)

生物體在受到有害刺激時會產(chǎn)生過多的活性氧自由基，繼而對體內(nèi)細胞和線粒體展開攻擊，使其結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變，引發(fā)衰老等疾病?？寡趸瘎┛赏ㄟ^酶促反應(yīng)或非酶促反應(yīng)清除過多的活性氧自由基，現(xiàn)有的抗氧化劑有合成及天然兩種。合成抗氧化劑價格低廉、抗氧化活性高，但研究表明其具有致癌、致畸、致突變等不良后果；天然抗氧化劑主要是抗氧化肽，不僅可以清除自由基，還具有機體防御、免疫調(diào)節(jié)及促進礦物質(zhì)吸收等功能。

羅非魚是一種廣泛養(yǎng)殖的淡水魚，目前只有羅非魚肉被廣泛接受，而羅非魚的骨骼、內(nèi)臟和皮膚等沒有得到開發(fā)。尤其是羅非魚皮雖含有豐富的膠原蛋白，但迄今為止并沒有關(guān)于以羅非魚皮為原料制備抗氧化肽的相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明是為了解決現(xiàn)有技術(shù)所存在的上述技術(shù)問題，提供一種利用羅非魚皮制備的抗氧化肽及制備方法。

本發(fā)明的技術(shù)解決方案是：一種利用羅非魚皮制備的抗氧化肽，所述抗氧化肽的氨基酸序列為Gly-Asn-Ala-Gly-Pro-Thr-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Leu。

一種利用羅非魚皮制備的抗氧化肽的制備方法，依次按照如下步驟進行：

a.?將羅非魚皮清洗攪碎后加入堿性蛋白酶進行酶解，得到羅非魚皮酶解液，所述酶解條件是pH8.0~12.0、溫度35~65℃、加酶量為總質(zhì)量的1~6%、料液比為1：20~80g/ml、酶解時間為5.0~15.0h；

b.?將羅非魚皮酶解液沸水浴滅酶并快速冷卻，4℃條件下10000r/min離心10~20min，取上清液；

c.?將上清液進行超濾膜過濾，得分子量≤1000的組分；

d.?利用反相高效液相色譜儀對分子量≤1000的組分進行分離，得到分子量為1007Da，氨基酸序列為Gly-Asn-Ala-Gly-Pro-Thr-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Leu的抗氧化肽。

優(yōu)選制備方法，依次按照如下步驟進行：

a.?將羅非魚皮清洗攪碎后加入堿性蛋白酶進行酶解，得到羅非魚皮酶解液，所述酶解條件是pH10.0、溫度51℃、加酶量為總質(zhì)量的2.51%、料液比為1：5?0g/ml、酶解時間為9.0h；

b.?將羅非魚皮酶解液沸水浴滅酶15min并快速冷卻，4℃條件下10000r/min離心15min，取上清液；

c.?將上清液進行超濾膜過濾，得分子量≤1000的組分；

d.?利用反相高效液相色譜儀對分子量≤1000的組分進行分離，得到分子量為1007Da，氨基酸序列為Gly-Asn-Ala-Gly-Pro-Thr-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Leu的抗氧化肽。