[發(fā)明專利]一種水盾草無菌苗的快速培養(yǎng)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210230985.1
• 申請日: 2022-03-10
• 公開（公告）號: CN114431152B
• 公開（公告）日: 2023-09-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 請求不公布姓名
• 申請（專利權(quán)）人: 水生藻安生物科技（武漢）有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 武漢天領(lǐng)眾智專利代理事務(wù)所(普通合伙) 42300
• 代理人: 劉誠

本發(fā)明公開了一種水盾草無菌苗的快速培養(yǎng)方法，包括如下步驟：S1、外植體的采集與預(yù)處理，S2、外植體的消毒，S3、不定芽誘導(dǎo)，S4、不定芽增殖，S5、生根培養(yǎng)；本發(fā)明首先對外植體進(jìn)行采集與預(yù)處理，之后采用乙醇浸泡和升汞浸泡結(jié)合的方式，對外植體進(jìn)行消毒，達(dá)到理想的滅菌效果；之后分別控制誘導(dǎo)培養(yǎng)基中6?BA、IBA濃度，增殖培養(yǎng)基中6?BA、NAA的濃度，生根培養(yǎng)基中IBA濃度，能夠高效得到大量的水盾草無菌苗，大大縮短了育苗周期；本發(fā)明利用一個(gè)外植體誘導(dǎo)出不定芽，在固體培養(yǎng)基中進(jìn)行不定芽增殖培養(yǎng)生根培養(yǎng)后，經(jīng)過一個(gè)月的培養(yǎng)可以繁殖出6棵幼苗以上，另外，在液體培養(yǎng)基進(jìn)行增殖培養(yǎng)時(shí)，繁殖系數(shù)高達(dá)14以上，遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)越于自然水體植物的繁殖速度。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種水盾草無菌苗的快速培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

水盾草(學(xué)名：Cabomba?caroliniana)屬于莼菜科水盾草屬，在該屬中就水盾草一種，莼菜科的水生植物為單子葉植物，無菌繁殖有一定的難度系數(shù)。水盾草原產(chǎn)于南美，世界各地水族館引種，并在溫暖地區(qū)歸化，目前水草造景中經(jīng)常使用的水草種類就是水盾草。

水盾草為外來入侵種，它的侵?jǐn)_會(huì)引起水庫和池塘水平面的上升導(dǎo)致滲漏的增加、灌溉渠中的堵塞和泛濫；大量水盾草死亡后腐爛耗氧，對漁業(yè)造成危害；茂密的水盾草妨礙了湖泊和水庫的娛樂、農(nóng)業(yè)和美學(xué)功能；在澳大利亞水盾草有取代本土水生植物的趨勢，從而對生物多樣性造成影響。因此，水盾草的入侵和擴(kuò)散對我國國民經(jīng)濟(jì)和生態(tài)系統(tǒng)存在一定威脅。同時(shí)水盾草在國內(nèi)水族中的應(yīng)用也一直延續(xù)，市場需要大量優(yōu)質(zhì)的水盾草進(jìn)行水族造景，而自然界中水盾草有一定的生長周期，不能無限供應(yīng)，目前尚缺乏成熟技術(shù)實(shí)現(xiàn)水盾草的快速繁殖。

有鑒于此，本發(fā)明提出一種水盾草無菌苗的快速培養(yǎng)方法來解決上述技術(shù)問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種水盾草無菌苗的快速培養(yǎng)方法。本發(fā)明所述快速培養(yǎng)方法可以大規(guī)模擴(kuò)繁水盾草優(yōu)質(zhì)工程苗，同時(shí)為廣大科研工作者研究水盾草的入侵原理提供優(yōu)質(zhì)的種苗供應(yīng)，并且一年四季均可實(shí)現(xiàn)繁殖，因此，在水族造景領(lǐng)域中有良好的應(yīng)用前景。

為解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述技術(shù)問題，本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種水盾草無菌苗的快速培養(yǎng)方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1、外植體的采集與預(yù)處理：將收集的水盾草置于清水中培養(yǎng)，然后用洗滌劑清洗植株表面，之后在流水下沖洗，選擇生長健壯、無病蟲害的莖段，切成一定長度，并在無菌條件下用無菌術(shù)沖洗所述莖段，得到外植體；

S2、外植體的消毒：將步驟S1中得到的外植體置于無菌操作臺中，經(jīng)乙醇浸泡、升汞浸泡、無菌水沖洗后，用無菌濾紙蘸干外植體表面水分，得到消毒后的外植體；

S3、不定芽誘導(dǎo)：將步驟S2中得到的消毒后的外植體接種于無菌的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，之后在光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到不定芽；

S4、不定芽增殖：將步驟S3中得到的不定芽接種于無菌的增殖培養(yǎng)基中，之后在光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行增殖培養(yǎng)，得到叢生苗；

S5、生根培養(yǎng)：將步驟S4中得到的叢生苗接種于無菌的生根培養(yǎng)基中，之后在光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行生根培養(yǎng)，得到水盾草無菌苗。

進(jìn)一步地，步驟S1中，所述培養(yǎng)的時(shí)間為7～10d，所述流水下沖洗的時(shí)間為30～60min，所述莖段切斷的長度為2～3.5cm，所述莖段用無菌水沖洗3～5次。

進(jìn)一步地，步驟S2中，所述外植體先用80～90％乙醇充分浸泡30～45s，立即用無菌水沖洗4～6次，然后用升汞充分浸泡6～8min，立即用無菌水沖洗3～5次。

更進(jìn)一步地，所述升汞的質(zhì)量濃度為0.1％。