[發明專利]一種梅花離體再生的方法

在審

• 申請號: 202210224871.6
• 申請日: 2022-03-09
• 公開（公告）號: CN114431151A
• 公開（公告）日: 2022-05-06
• 發明（設計）人: 張俊衛;陳曼曼;鄭亞霞;張杰;包滿珠
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 覃蛟

1.一種梅花離體再生的方法，其特征在于，其包括：對再生的梅花不定芽進行伸長培養，所述伸長培養包括依次進行的第一階段伸長培養、第二階段伸長培養、第三階段伸長培養和第四階段伸長培養；

所述第一階段伸長培養采用第一培養基進行培養：所述第一培養基包括：在QL基本培養基中附加1-1.2mg/L的6-芐氨基嘌呤和0.1-0.12mg/L的吲哚丁酸；

所述第二階段伸長培養采用第二培養基進行培養：所述第二培養基包括：在QL基本培養基中附加0.7-0.9mg/L的6-芐氨基嘌呤和0.05-0.07mg/L的吲哚丁酸；

所述第三階段伸長培養采用第三培養基進行培養：所述第三培養基包括：在QL基本培養基中附加0.7-0.8mg/L的6-芐氨基嘌呤和0.06-0.07mg/L的吲哚丁酸；

所述第四階段伸長培養采用第四培養基進行培養：所述第四培養基包括：在QL基本培養基中附加0.6-0.7mg/L的6-芐氨基嘌呤和0.04-0.05mg/L的吲哚丁酸。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述第四培養基還包括30-50mg/L的間苯三酚；

優選地，所述第四培養基還包括40mg/L的間苯三酚。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一階段伸長培養的時間為12-25d，而后轉入所述第二培養基中進行培養。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述第二階段伸長培養的時間為12-25d，而后轉入所述第三培養基中進行培養。

5.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述第三階段伸長培養的時間為18-22d，而后轉入所述第四培養基中進行培養。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述第四階段伸長培養的時間為20-25d；

優選地，所述第四階段伸長培養的時間為25d。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一培養基、第二培養基、第三培養基和第四培養基均添加有輔助成分，所述輔助成分在各培養基中的含量為：蔗糖30-32g/L、瓊脂7.5-7.8g/L、水解酪蛋白0.5-0.6g/L和MES 0.5-0.6g/L。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述伸長培養的條件為：溫度24±2℃，光照強度10000-12000Lx，光照周期為：16h光培養和8h暗培養。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法還包括不定芽的再生，所述不定芽的再生是將梅花成熟胚子葉接種到再生培養基中培養，黑暗環境中培養7d，隨后轉入光下培養。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，所述再生培養基包括在QL基本培養基中附加0.5-0.6mg/L的6-芐氨基嘌呤、1.0-1.2mg/L噻苯隆和0.7-0.8mg/L的吲哚丁酸。