[發明專利]一種用于制備IgM類校準品的方法在審
| 申請號： | 202210220177.7 | 申請日： | 2022-03-08 |
| 公開（公告）號： | CN114544295A | 公開（公告）日： | 2022-05-27 |
| 發明（設計）人： | 熊雨勝;張薇;周歡 | 申請（專利權）人： | 武漢原谷生物科技有限責任公司 |
| 主分類號： | G01N1/28 | 分類號： | G01N1/28;G01N1/34 |
| 代理公司： | 武漢天領眾智專利代理事務所(普通合伙) 42300 | 代理人： | 劉誠 |
| 地址： | 430000 湖北省武漢市東湖新技術*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 制備 igm 校準 方法 | ||
1.一種用于制備IgM類校準品的方法，其特征在于，包括以下步驟：
步驟一：羊多抗的獲取：按固定免疫程序免疫羊，當效價合格后，提取血清；
步驟二：羊多抗的純化：使用親和層析法純化提取到的羊多抗血清；
步驟三：羊多抗的切割：使用酶對羊多抗IgG進行切割，純化羊多抗中的Fab片段，并將純化后的Fab片段用于后續偶聯；
步驟四：人IgM與Fab片段的偶聯：使用化學方法將人IgM與羊多抗的Fab片段進行偶聯；
步驟五：檢測：將人IgM與羊多抗的Fab片段進行偶聯后的產物進行親和性測試以及老化試驗測試；
步驟六：再調整：根據步驟五中檢測的結果對人IgM與羊多抗的Fab片段進行偶聯的位置以及操作方法進行調整；
步驟七：培育：將步驟六中再調整后的人IgM與羊多抗的Fab片段偶聯得到的校準品進行培育，同時進三組不同環境的實驗，選擇出最適合培育的環境。
2.根據權利要求1所述的一種用于制備IgM類校準品的方法，其特征在于，所免疫的某蛋白主要為傳染病抗原。
3.根據權利要求1所述的一種用于制備IgM類校準品的方法，其特征在于，切割羊多抗獲取Fab的酶包括木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等。
4.根據權利要求1所述的一種用于制備IgM類校準品的方法，其特征在于，人IgM與Fab片段的化學偶聯劑包括SMCC、SATA、DSS、馬來酰亞胺基等化學偶聯劑。
5.根據權利要求1所述的一種用于制備IgM類校準品的方法，其特征在于，人IgM與Fab中的偶聯比例為1:2-1:10。
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