[發明專利]一種用于鹽酸環苯扎林緩釋膠囊的質量檢測方法

在審

• 申請號: 202210218964.8
• 申請日: 2022-03-08
• 公開（公告）號: CN114563369A
• 公開（公告）日: 2022-05-31
• 發明（設計）人: 陳陽生;孫桂玉;臧云龍;劉曉霞;王明剛;王清亭;杜昌余;劉振玉;張麗敏;耿立朵
• 申請（專利權）人: 正大制藥（青島）有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N21/33;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N33/15;C12N1/20;C12N1/14;C12R1/19;C12R1/445;C12R1/125;C12R1/685;C12R1/725
• 代理公司: 北京睿博行遠知識產權代理有限公司 11297
• 代理人: 申超平

1.一種用于鹽酸環苯扎林緩釋膠囊的質量檢測方法，其特征在于：包括以下步驟：

步驟一，樣品來源選擇：選擇鹽酸環苯扎林緩釋膠囊；

步驟二，紫外-可見分光光度法的鑒別：鹽酸環苯扎林有紫外特征吸收峰，可以用來鑒別本品中的鹽酸環苯扎林；

取本品1粒，將內容物全部傾入50ml(15mg規格)或100ml(30mg規格)量瓶中，加甲醇2ml，振搖5分鐘，再加水10ml，超聲處理使鹽酸環苯扎林溶解，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，量取濾液適量，用甲醇稀釋制成每1ml中約含鹽酸環苯扎林15μg的溶液，照紫外-可見分光光度法，在200～400nm的波長范圍內測定；

步驟三，釋放試驗測試：

步驟四，微生物的檢測：

首先菌懸液的制備，再對供試液制備，最后進行驗證；具體驗證方法為：

分別取1∶10供試液10ml，加入至100ml無菌膽鹽乳糖，后在上述膽鹽乳糖培養基中加入1ml大腸埃希菌菌液，35～37℃培養18～24小時，按大腸埃希菌檢查法進行檢查；

空白對照組：分別取pH7.0的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液10ml，加入至100ml無菌膽鹽乳糖培養基中，35～37℃培養18～24小時；

供試品陰性菌對照組：取1∶10供試液10ml，加入至100ml無菌營養肉湯培養基中，并加入金黃色葡萄球菌1ml，35～37℃培養18～24小時；

稀釋劑對照組：取滅菌pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液10ml，加入試驗菌，使菌液濃度在50～100cfu/ml，加入至100ml無菌膽鹽乳糖培養基中，35～37℃培養18～24小時；

菌液組：在100ml無菌膽鹽乳糖培養基中加入1ml大腸埃希菌菌液，35～37℃培養18～24小時。

2.根據權利要求1所述的一種用于鹽酸環苯扎林緩釋膠囊的質量檢測方法，其特征在于，所述釋放試驗測定方法取本品，照釋放度測定法，采用溶出度測定法裝置，分別以0.1mol/L鹽酸、pH4.5醋酸-醋酸鈉緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、水各900ml為釋放介質，轉速為每分鐘50轉，依法操作，分別在1、2、4、6、8、12、16、20、24小時，各取溶液5ml，濾過，并即時補充相同溫度的釋放介質5ml，精密量取續濾液20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取鹽酸環苯扎林對照品適量，精密稱定，加釋放介質溶解并定量稀釋制成每1ml約含鹽酸環苯扎林17μg(15mg規格)或33μg(30mg規格)的溶液，同法測定，按外標法以峰面積計算每粒在不同時間的釋放量，以時間(小時)對6粒的累積釋放量(％)作曲線，即得各批樣品的釋放曲線。

3.根據權利要求2所述的一種用于鹽酸環苯扎林緩釋膠囊的質量檢測方法，其特征在于，所述釋藥曲線相似性判斷標準：

其中，Rt為在t時參照品的釋藥百分率；Tt為在t時試驗品的釋藥百分率；n為試驗點數；f2取值范圍在0～100之間，隨著釋放百分率差異增大，f2值顯著減小；f2值大表示兩曲線間差異小，即相似性大。當兩釋藥曲線完全相同時，f2＝100；當兩曲線平均相差10％時，f2＝50。當f2值在50～100范圍內時，表明兩釋藥曲線相似；當f2小于50時，則表明兩釋藥曲線有顯著性差異。

4.根據權利要求1所述的一種用于鹽酸環苯扎林緩釋膠囊的質量檢測方法，其特征在于，所述菌液的制備：接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養物至10ml營養肉湯培養基中，35～37℃培養18～24小時；取此培養物1ml至0.9％無菌氯化鈉溶液9ml中，采用10倍遞增稀釋法稀釋至10-5～10-7，使菌液濃度為50～100cfu/ml；

接種白色念珠菌的新鮮培養基物至10ml改良馬丁培養基中，23～28℃培養24～48小時；取上述培養物1ml至0.9％無菌氯化鈉溶液9ml中，采用10倍遞增稀釋法稀釋至10-5～10-7，使菌液濃度為50～100cfu/ml；

接種黑曲霉的新鮮培養物至改良馬丁瓊脂斜面培養基上，23～28℃培養5～7天，加入3～5ml含聚山梨酯80的0.9％無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫，然后，吸出孢子懸液1ml至0.9％無菌氯化鈉溶液9ml中，采用10倍遞增稀釋法稀釋至10-4～10-6，使菌液濃度為50～100cfu/ml。