[發明專利]一種磁珠法病毒核酸提取試劑盒以及使用方法在審
| 申請號: | 202210215819.4 | 申請日: | 2022-03-07 |
| 公開(公告)號: | CN114438076A | 公開(公告)日: | 2022-05-06 |
| 發明(設計)人: | 傅明華;李美瓊;夏姝瑞;聶晶 | 申請(專利權)人: | 江蘇迅睿生物技術有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/10 | 分類號: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 北京棘龍知識產權代理有限公司 11740 | 代理人: | 張開 |
| 地址: | 221000 江蘇省徐州市經濟技*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 磁珠法 病毒 核酸 提取 試劑盒 以及 使用方法 | ||
1.一種磁珠法病毒核酸提取試劑盒,其特征在于,包括裂解液、磁珠液、洗滌液Ⅰ、洗滌液Ⅱ、洗滌液Ⅲ及洗脫液,所述所述裂解液由以下物質組成:Tris-HCl,硫氰酸胍,EDTA,Triton-100,PEG-6000,SDS,異丙醇,水;
所述洗滌液Ⅰ包括以下原料:Tris-HCl、鹽酸胍;
所述洗滌液Ⅱ、洗滌液Ⅲ包括以下原料:乙醇;
所述洗脫液包括以下原料:EDTA、Tris-HCl。
2.根據權利要求1所述的一種磁珠法病毒核酸提取試劑盒,其特征在于,所述裂解液由以下物質組成:0.1M-0.5M Tris-HCl,3-5M硫氰酸胍,10-40mmEDTA,2-5% PEG-6000,1%-3%SDS,4.5-9%Triton-100,5-15%異丙醇,其余量為水。
3.根據權利要求1所述的一種磁珠法病毒核酸提取試劑盒,其特征在于,所述磁珠液,為外購磁珠,磁珠濃度為20-50mg/mL。
4.根據權利要求1所述的一種磁珠法病毒核酸提取試劑盒,其特征在于,洗滌液Ⅰ由以下物質組成:1-3M鹽酸胍,0.1M-0.5M Tris-HCl。
5.根據權利要求1所述的一種磁珠法病毒核酸提取試劑盒,其特征在于,所述所述洗滌液Ⅱ、洗滌液Ⅲ由以下物質組成:60-85%乙醇。
6.根據權利要求1所述的一種磁珠法病毒核酸提取試劑盒,其特征在于,所述洗脫液由以下物質組成:1-5mmEDTA、4-10mmTris-HCl。
7.如權利要求1-6任一所述的一種磁珠法病毒核酸提取試劑盒的使用方法,其特征在于,包括以下步驟:
S1、向生物樣本中加入裂解液、磁珠,混合裂解;
S2、將裝有混合液的離心管置于磁力架,待磁珠完全被吸附后,棄掉上清液;
S3、加入所述洗滌液Ⅰ混勻后,將裝有混合液的離心管置于磁力架,待磁珠完全被吸附后,棄掉上清液
S4、加入所述洗滌液Ⅱ混勻后,將裝有混合液的離心管置于磁力架,待磁珠完全被吸附后,棄掉上清液;
S5、加入所述洗滌液Ⅲ混勻后,將裝有混合液的離心管置于磁力架,待磁珠完全被吸附后,棄掉上清液;
S6、將磁珠晾干后,加入所述洗脫液,50-80℃溫育洗脫后,收集核酸液并保存。
8.根據權利要求7所述的一種磁珠法病毒核酸提取試劑盒,其特征在于,所述生物樣本包括唾液、咽拭子、血清、血漿、糞便。
9.根據權利要求1所述的一種磁珠法病毒核酸提取試劑盒,其特征在于,包括:試劑瓶、試劑密封帽以及密封結構;
所述試劑瓶與實際密封帽之間通過螺紋嚙合,所述密封結構位于密封帽與試劑瓶的瓶口之間;
所述試劑密封帽包含:密封面板、面板塞、彈性頂柱;
所述密封面板位于面板塞上,彈性頂柱位于密封帽與密封面板之間;
還包括:環狀密封盤、環形密封條、以及環形連接體;
所述環形連接體與實際密封帽的底部一體成型,且向外延伸,所述環狀密封盤位于試劑瓶上,所述環形連接體的底部具有一圈的嵌入槽,環形密封條潛入到環形連接體的嵌入槽中;
所述環狀密封盤上也開設有與環形密封條寬度相同的嵌入槽,所述環形密封條的底部進入到環狀密封盤的嵌入槽中。
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