[發(fā)明專利]一種低共熔溶劑提取，動態(tài)軸向色譜制備羥基山椒素方法

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• 申請日: 2022-03-03
• 公開（公告）號: CN114573474A
• 公開（公告）日: 2022-06-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙麟;王晗;朱翔;邸多隆;文成剛;裴棟
• 申請（專利權(quán)）人: 四川幺麻子生物科技有限公司;中國科學(xué)院蘭州化學(xué)物理研究所
• 主分類號: C07C233/20
• 分類號: C07C233/20;C07C231/24
• 代理公司: 成都九鼎天元知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 51214
• 代理人: 呂玲

本發(fā)明為一種低共熔溶劑提取，動態(tài)軸向色譜制備羥基山椒素方法，屬于天然產(chǎn)物提取領(lǐng)域。該方法包括以下步驟：S1，以超臨界CO₂萃取藤椒油為原料，加入低共熔溶劑進(jìn)行超聲輔助提取，萃取完成后離心，收集下層DES層，得到羥基山椒素類化合物DES提取液；所得提取液經(jīng)有機(jī)溶劑反萃取法，回收羥基山椒素類成分，得到羥基山椒素類成分富集產(chǎn)物；S2，動態(tài)軸向制備色譜分離純化：羥基山椒素類成分富集產(chǎn)物用1?3倍質(zhì)量體積的流動相完全溶解，采用動態(tài)軸向壓縮制備液相分離，流動相為甲醇和水等。該工藝過程簡單，不需要大量的純化步驟，溶劑方便回收，純度高，適合大批量工業(yè)化生產(chǎn)，具有很強(qiáng)的使用價值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明為一種低共熔溶劑提取，動態(tài)軸向色譜制備羥基山椒素方法，屬于天然產(chǎn)物提取領(lǐng)域。

背景技術(shù)

藤椒(竹葉花椒，Zanthoxylum armatum DC)是中國傳統(tǒng)藥食兩用資源，氣味清香、柔和、無刺激和苦澀味。研究表明，山椒素及其由烷基不飽和度差異或碳鏈氧化引起結(jié)構(gòu)變化的酰胺類同系物被視為藤椒麻味物質(zhì)基礎(chǔ)，也是重要品質(zhì)保障，以羥基-α-山椒素、羥基-β-山椒素，羥基-γ-山椒素，羥基-ε-山椒素為主，可能通過激活瞬時受體電位(transientreceptor potential,TRP)V1和TRPA1或阻斷離子通道引發(fā)辛麻感，同時具有麻醉鎮(zhèn)痛、消炎、保護(hù)腸道等功能。然而，該類化合物結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，在空氣中極易發(fā)生異構(gòu)化、水解和氧化，導(dǎo)致高純度山椒素類的大規(guī)模制備存在技術(shù)瓶頸。目前國內(nèi)外尚未建立花椒/藤椒麻味評價及適用于工業(yè)生產(chǎn)的麻味物質(zhì)提取的標(biāo)準(zhǔn)方法，導(dǎo)致花椒和藤椒原料及其制品的質(zhì)量良莠不齊，嚴(yán)重影響消費者的利益和市場有效監(jiān)管。

中國專利CN102771747B，CN102690208A，CN105237430A公布的山椒素類化合物的制備工藝包括，利用有機(jī)溶劑或超臨界CO₂等對花椒/藤椒樣品進(jìn)行提取，進(jìn)而采用硅膠、凝膠色譜純化，收集不同洗脫條件下的餾分，進(jìn)而利用制備型薄層色譜、制備/半制備型HPLC等儀器得到較高純度單體，制備過程繁瑣復(fù)雜，制備量小，效率低，因此，研究一種能夠從藤椒中快速、宏量提取制備出多種高純度單體的制備工藝具有重大的科學(xué)意義和工程應(yīng)用價值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種低共熔溶劑提取，動態(tài)軸向色譜制備羥基山椒素方法，該方法是一種基于綠色新型低共熔溶劑提取，工業(yè)級快速制備高純度羥基山椒素類化合物的方法，為藤椒麻味成分分析和質(zhì)量評價提供對照品。

本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案來實現(xiàn)：

一種工業(yè)級快速制備高純度山椒素類化合物的方法，包括以下步驟：

S1，以超臨界CO₂萃取藤椒油為原料，加入低共熔溶劑(DES)，超聲輔助提取，萃取完成后離心，收集下層DES層，得到羥基山椒素類成分DES提取液；所得提取液經(jīng)有機(jī)溶劑反萃取法，回收羥基山椒素類成分，得到羥基山椒素類成分富集產(chǎn)物。

作為優(yōu)選，所述低共熔溶劑由如下方法制得，氫鍵供體與氫鍵受體按一定摩爾比比例混合，封口后置于80℃加熱共溶至澄清，形成DES溶劑，常溫下靜置備用。

作為優(yōu)選，所述氫鍵供體為氯化膽堿，氫鍵受體為甲酸、乙酸、乳酸中的一種，摩爾比為1:2。

作為優(yōu)選，所述離心轉(zhuǎn)速為4000r/mi，離心時間為10min。

作為優(yōu)選，所述超聲輔助的處理條件為料液比為1:5～1:10(w/v)，萃取功率為150～200w，提取時間為0.5h。

作為優(yōu)選，所述反萃取采用的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯，料液比為1:5～1:10。

S2，動態(tài)軸向制備色譜分離純化：山椒素類富集物用1-3倍質(zhì)量體積的流動相完全溶解，采用動態(tài)軸向壓縮制備液相分離，流動相為甲醇和水，檢測波長為254nm，根據(jù)不同保留時間收集目標(biāo)成分，洗脫液經(jīng)減壓旋蒸濃縮，冷凍干燥后得到各單體化合物。