[發明專利]一種小柴胡膠囊糖類成分的定量指紋圖譜檢測方法

在審

• 申請號: 202210208274.4
• 申請日: 2022-03-04
• 公開（公告）號: CN114544816A
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發明（設計）人: 龔行楚;方愛軍;蘭婧;吳琳琳;邰艷妮;周鵬;虞焰鈞;李道超
• 申請（專利權）人: 浙江贊生藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 萬尾甜;韓介梅

本發明公開了一種小柴胡膠囊糖類成分的定量指紋圖譜檢測方法，該方法具體為：(1)制備供試品溶液和對照品混合溶液，對照品混合溶液的制備方法為：以核糖醇、果糖、蔗糖、水蘇糖為對照品，分別加入溶劑溶解并混合均勻得到；(2)采用高效液相色譜儀對步驟(1)制備的兩種溶液進行分析，其中色譜條件為：儀器選用高效液相色譜系統，色譜柱選用Asahipak NH2P?50 4E色譜柱(4.6×250mm，5μm)；以水(A)?乙腈(B)作為流動相進行梯度洗脫，洗脫方式：0～10min，78％～74％B；10～28min，74％～50％B；28～33min，50％B，流量：0.6ml/min；柱溫：30℃；(3)根據所有不同批次的色譜圖確定共有峰和定量檢測指標，計算不同批次的含量以及相似度，為小柴胡膠囊的質量控制提供科學依據。

技術領域

本發明涉及一種中藥的檢測方法，具體涉及小柴胡膠囊糖類成分的定量指紋圖譜檢測方法。

背景技術

小柴胡膠囊是由柴胡、黃芩、甘草、黨參、大棗、生姜、姜半夏七味藥材通過煎煮、滲漉、濃縮、干燥等工藝制備而成，可用于外感病，邪犯少陽證，癥見寒熱往來、胸脅苦滿、食欲不振、心煩喜嘔、口苦咽干等。2020版《中國藥典》(一部)采用高效液相色譜法測定小柴胡膠囊中的黃芩苷含量用于其質量控制，同時采用柴胡、甘草、黨參對照藥材定性鑒別這三味藥材。考慮到小柴胡膠囊藥味較多，藥典中只針對黃芩苷這一種成分進行定量檢測的方法無法全面體現出制劑質量，因此需要建立指紋圖譜方法進行綜合性整體評價。

多指標成分同時定量檢測在2020版《中國藥典》(一部)使用很多，是公認檢測中藥質量的可行方法。指紋圖譜是另一種檢測中藥質量的有效方法，采用相似度等指標總體體現指紋圖譜的光譜或者色譜峰信息，就可以定量地反映中藥整體質量情況，所以近年來指紋圖譜技術得到了長足發展。

但目前文獻中對于小柴胡膠囊質控方法報道較少。尤其是未見小柴胡膠囊中糖類成分定量指紋圖譜方法的報道。

發明內容

本發明的主要目的是提供一種小柴胡膠囊糖類成分的定量指紋圖譜，該檢測方法可以彌補現有分析方法對于藥效成分質量控制的不足，從而更加全面的評價小柴胡膠囊的質量，對于控制小柴胡膠囊的質量和臨床療效有著重要作用。

為了實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

本發明的目的之一：提供一種小柴胡膠囊糖類成分的指紋圖譜檢測方法，所述的小柴胡膠囊包括以下藥材：柴胡、黃芩、甘草、黨參、大棗、生姜、姜半夏。所述的指紋圖譜檢測方法，包括以下步驟：

(1)對照品混合溶液以及供試品溶液的制備：

對照品混合溶液的制備：精密稱定核糖醇、果糖、蔗糖、水蘇糖對照品，分別用60％乙腈溶液溶解并定容至10ml，搖勻后得到4種對照品溶液，將4種單標各移取適量于同一50ml容量瓶中，加入60％乙腈溶液精密定容，搖勻后得到混標儲備液。將混標儲備液稀釋5倍，即得含0.6512mg/ml核糖醇、2.189mg/ml果糖、1.636mg/ml蔗糖、0.6767mg/ml水蘇糖組成的對照品混合溶液。

供試品溶液的制備：取小柴胡膠囊內容物于研缽中，研碎，精密稱定，置于25mL容量瓶中，加入60％乙腈溶液，加熱超聲溶解，放冷至室溫后定容，搖勻，離心，取上清液，即得。

(2)高效液相色譜測定

將步驟(1)中的對照品混合溶液和供試品溶液注入液相色譜分析測定，儀器為：Thermo Scientific Ultimate3000高效液相色譜儀；色譜條件為：色譜柱：NH2P-50 4E色譜柱(4.6×250mm，5μm)，以水(A)-乙腈(B)作為流動相進行梯度洗脫，洗脫方式：0～10min，78％～74％B；10～28min，74％～50％B；28～33min，50％B，流量：0.6ml/min；柱溫：30℃；電噴霧式檢測器(CAD)的霧化溫度35℃，采樣頻率10Hz，濾光片5s，冪函數1.0，進樣體積為10μL。