[發(fā)明專利]一種小柴胡膠囊糖類成分的定量指紋圖譜檢測(cè)方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210208274.4
• 申請(qǐng)日: 2022-03-04
• 公開（公告）號(hào): CN114544816A
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 龔行楚;方愛軍;蘭婧;吳琳琳;邰艷妮;周鵬;虞焰鈞;李道超
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江贊生藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 杭州求是專利事務(wù)所有限公司 33200
• 代理人: 萬尾甜;韓介梅

本發(fā)明公開了一種小柴胡膠囊糖類成分的定量指紋圖譜檢測(cè)方法，該方法具體為：(1)制備供試品溶液和對(duì)照品混合溶液，對(duì)照品混合溶液的制備方法為：以核糖醇、果糖、蔗糖、水蘇糖為對(duì)照品，分別加入溶劑溶解并混合均勻得到；(2)采用高效液相色譜儀對(duì)步驟(1)制備的兩種溶液進(jìn)行分析，其中色譜條件為：儀器選用高效液相色譜系統(tǒng)，色譜柱選用Asahipak NH2P?50 4E色譜柱(4.6×250mm，5μm)；以水(A)?乙腈(B)作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，洗脫方式：0～10min，78％～74％B；10～28min，74％～50％B；28～33min，50％B，流量：0.6ml/min；柱溫：30℃；(3)根據(jù)所有不同批次的色譜圖確定共有峰和定量檢測(cè)指標(biāo)，計(jì)算不同批次的含量以及相似度，為小柴胡膠囊的質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種中藥的檢測(cè)方法，具體涉及小柴胡膠囊糖類成分的定量指紋圖譜檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

小柴胡膠囊是由柴胡、黃芩、甘草、黨參、大棗、生姜、姜半夏七味藥材通過煎煮、滲漉、濃縮、干燥等工藝制備而成，可用于外感病，邪犯少陽證，癥見寒熱往來、胸脅苦滿、食欲不振、心煩喜嘔、口苦咽干等。2020版《中國藥典》(一部)采用高效液相色譜法測(cè)定小柴胡膠囊中的黃芩苷含量用于其質(zhì)量控制，同時(shí)采用柴胡、甘草、黨參對(duì)照藥材定性鑒別這三味藥材。考慮到小柴胡膠囊藥味較多，藥典中只針對(duì)黃芩苷這一種成分進(jìn)行定量檢測(cè)的方法無法全面體現(xiàn)出制劑質(zhì)量，因此需要建立指紋圖譜方法進(jìn)行綜合性整體評(píng)價(jià)。

多指標(biāo)成分同時(shí)定量檢測(cè)在2020版《中國藥典》(一部)使用很多，是公認(rèn)檢測(cè)中藥質(zhì)量的可行方法。指紋圖譜是另一種檢測(cè)中藥質(zhì)量的有效方法，采用相似度等指標(biāo)總體體現(xiàn)指紋圖譜的光譜或者色譜峰信息，就可以定量地反映中藥整體質(zhì)量情況，所以近年來指紋圖譜技術(shù)得到了長足發(fā)展。

但目前文獻(xiàn)中對(duì)于小柴胡膠囊質(zhì)控方法報(bào)道較少。尤其是未見小柴胡膠囊中糖類成分定量指紋圖譜方法的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的主要目的是提供一種小柴胡膠囊糖類成分的定量指紋圖譜，該檢測(cè)方法可以彌補(bǔ)現(xiàn)有分析方法對(duì)于藥效成分質(zhì)量控制的不足，從而更加全面的評(píng)價(jià)小柴胡膠囊的質(zhì)量，對(duì)于控制小柴胡膠囊的質(zhì)量和臨床療效有著重要作用。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

本發(fā)明的目的之一：提供一種小柴胡膠囊糖類成分的指紋圖譜檢測(cè)方法，所述的小柴胡膠囊包括以下藥材：柴胡、黃芩、甘草、黨參、大棗、生姜、姜半夏。所述的指紋圖譜檢測(cè)方法，包括以下步驟：

(1)對(duì)照品混合溶液以及供試品溶液的制備：

對(duì)照品混合溶液的制備：精密稱定核糖醇、果糖、蔗糖、水蘇糖對(duì)照品，分別用60％乙腈溶液溶解并定容至10ml，搖勻后得到4種對(duì)照品溶液，將4種單標(biāo)各移取適量于同一50ml容量瓶中，加入60％乙腈溶液精密定容，搖勻后得到混標(biāo)儲(chǔ)備液。將混標(biāo)儲(chǔ)備液稀釋5倍，即得含0.6512mg/ml核糖醇、2.189mg/ml果糖、1.636mg/ml蔗糖、0.6767mg/ml水蘇糖組成的對(duì)照品混合溶液。

供試品溶液的制備：取小柴胡膠囊內(nèi)容物于研缽中，研碎，精密稱定，置于25mL容量瓶中，加入60％乙腈溶液，加熱超聲溶解，放冷至室溫后定容，搖勻，離心，取上清液，即得。

(2)高效液相色譜測(cè)定

將步驟(1)中的對(duì)照品混合溶液和供試品溶液注入液相色譜分析測(cè)定，儀器為：Thermo Scientific Ultimate3000高效液相色譜儀；色譜條件為：色譜柱：NH2P-50 4E色譜柱(4.6×250mm，5μm)，以水(A)-乙腈(B)作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，洗脫方式：0～10min，78％～74％B；10～28min，74％～50％B；28～33min，50％B，流量：0.6ml/min；柱溫：30℃；電噴霧式檢測(cè)器(CAD)的霧化溫度35℃，采樣頻率10Hz，濾光片5s，冪函數(shù)1.0，進(jìn)樣體積為10μL。