[發明專利]一種牛紐布病毒TaqMan熒光定量RT-PCR檢測引物、探針及應用在審
| 申請號： | 202210199698.9 | 申請日： | 2022-03-02 |
| 公開（公告）號： | CN114703321A | 公開（公告）日： | 2022-07-05 |
| 發明（設計）人： | 周偉光;趙潤濤;張志丹;悉尼尼根;王旭芬;侯琳;張賀;趙洋 | 申請（專利權）人： | 內蒙古農業大學 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人： | 崔自京 |
| 地址： | 010018 內蒙古自*** | 國省代碼： | 內蒙古;15 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 種牛 病毒 taqman 熒光 定量 rt pcr 檢測 引物 探針 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種牛紐布病毒TaqMan熒光定量RT-PCR檢測引物，其特征在于，包括：引物NB-F-4716，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；引物NB-R-4949，核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.如權利要求1所述的檢測引物，其特征在于，還包括探針NBV-TZ，核苷酸序列如SEQID NO.3所示。
3.含有權利要求2所述引物的試劑或試劑盒。
4.一種非診斷治療目的使用TaqMan熒光定量RT-PCR檢測牛紐布病毒的方法，其特征在于，使用權利要求2所述的引物。
5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，包括擴增體系：GoTaq Probe qPCRMasterMix 10μL，ScriptTMRT-MIX for 1-Step RT-qPCR 2×0.4μL，10μmol/L上下游引物各1μL，10μmol/L探針0.8μL，cDNA模板2μL，余量RNase-Free ddH2O，總體積為20μL。
6.如權利要求4所述的方法，其特征在于，包括擴增程序：45℃反轉錄15min；95℃預變性2min；95℃變性15s，55℃退火30s，72℃延伸30s，共45個循環。
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