[發明專利]基于Fe-PDAN的高效熒光淬滅試紙條及其制備方法和檢測方法

在審

• 申請號: 202210196123.1
• 申請日: 2022-03-01
• 公開（公告）號: CN114720437A
• 公開（公告）日: 2022-07-08
• 發明（設計）人: 鄧省亮;賴衛華;賴曉翠;章鋼剛;陳愛亮;蘇柳;賀偉華
• 申請（專利權）人: 江西省科學院微生物研究所（江西省流域生態研究所）
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N33/533;G01N33/543
• 代理公司: 南昌大牛知識產權代理事務所(普通合伙) 36135
• 代理人: 劉俊文

本發明公開了一種基于Fe?PDAN的高效熒光淬滅試紙條及其制備方法和檢測方法。該熒光淬滅試紙條以Fe?PDAN作為信標載體。通過將樣本墊、噴涂有Fe?PDAN待測物抗體復合物的玻璃纖維墊、噴涂有待測物人工偶聯抗原和量子點熒光微球作為檢測線且噴涂有抗鼠抗體或抗兔抗體作為質控線的硝酸纖維素膜、吸水紙依次搭接粘貼在底板上組裝得到。檢測時通過讀取熒光淬滅試紙條的熒光強度數據，或者在紫外燈照射下觀察檢測線有無熒光條帶實現定量檢測和定性判斷。本發明制備的熒光淬滅試紙條首次以Fe?PDAN作為信標載體，相比于PDAN，其淬滅量子點熒光微球熒光的能力更強，穩定性高，制備得到的熒光淬滅試紙條穩定性強且檢測靈敏度高。

技術領域

本發明屬于食品安全檢測和醫學檢驗領域，具體涉及一種基于Fe-PDAN的高效熒光淬滅試紙條及其制備方法和檢測方法。

背景技術

免疫層析技術是一種基于抗原抗體特異性反應的檢測方法，具有檢測速度快、特異性好、操作簡單和費用低等優點，相比于其它方法更能滿足現場大批量檢測的需求，因此近年來發展迅猛，被廣泛應用于食品安全、醫學檢驗和環境污染物監測等領域。其中膠體金免疫層析試紙條是應用最廣泛的一種免疫層析產品，但其靈敏度較差且易受基質干擾。因此近年來的免疫層析技術主要有三個發展方向：一是采用免疫磁分離富集技術從復雜基質中分離濃縮目標物以避免樣品基質的干擾；二是通過信號放大系統(如生物素-鏈霉親和素系統等)以提高免疫層析方法的靈敏度；三是采用新型標記物(如熒光微球)，提高信號輸出或轉變信號輸出類型，以達到提高靈敏度的目的。

基于熒光淬滅的生物傳感器已廣泛應用于食品安全、臨床診斷、環境監測等領域中各種生物分子的靈敏檢測。淬滅劑的熒光淬滅能力是決定生物傳感器性能的關鍵因素。目前常用的淬滅劑一般是具有電子吸收能力的小分子，如黑洞淬滅劑(BHQ)染料，這是一類高效的暗淬滅劑，不同的BHQ對不同波長的特定熒光淬滅效果顯著。然而，這種基于小分子淬滅劑的探針缺乏高效靶向和多模態傳感能力。

目前，各種納米材料，如氧化石墨烯、膠體金納米粒子、膠體銀納米粒子、金納米花、磁性納米粒子、二氧化錳納米片、二硫化鉬納米片等，已被廣泛應用于制備熒光淬滅生物傳感器對各種生物分子進行靈敏檢測。與小分子熒光淬滅劑不同，納米淬滅劑具有淬滅多個不同發射波長的熒光團的能力，從而消除了需要仔細選擇熒光團淬滅劑的麻煩問題。

多巴胺(DA)是一種重要的神經遞質，在堿性溶液和有氧環境下，通過氧化作用能夠自聚合形成聚多巴胺(PDA)。以鹽酸多巴胺為原料，在氫氧化鈉溶液或三羥甲基氨基甲烷(Tris)緩沖液中快速聚合，可制備出具有一定粒徑的聚多巴胺微球(PDAN)。此外，多巴胺和聚多巴胺豐富的表面官能團如胺基、羥基、兒茶酚等使PDAN具有良好的生物相容性以及對各種金屬離子的配位能力，適合進一步進行表面修飾。近年來，聚多巴胺作為一種高效的有機暗淬滅劑，因其負載能力強、表面功能化容易、生物相容性好等優點，在熒光生物成像和檢測分析中得到了廣泛的應用。

發明內容

本發明的目的是解決現有技術的不足，提供一種熒光淬滅試紙條，具體采用以下的技術方案：

一種基于Fe-PDAN的高效熒光淬滅試紙條，所述熒光淬滅試紙條以Fe-PDAN作為信標載體；所述Fe-PDAN為鐵離子配位聚多巴胺形成的金屬多酚網絡微球，其制備過程包括以下步驟：將鹽酸多巴胺溶液加入至FeCl₃溶液中，攪拌反應后形成配位化合物，再加入Tris溶液，鹽酸多巴胺于堿性條件下氧化聚合形成聚多巴胺，反應結束后離心棄上清，清洗沉淀物后將沉淀物復溶于緩沖液中，即制得Fe-PDAN。