[發(fā)明專利]一種大萼香茶菜皂苷A和B單體的分離純化方法及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210195343.2
• 申請日: 2022-03-01
• 公開（公告）號: CN114349808B
• 公開（公告）日: 2023-09-29
• 發(fā)明（設計）人: 李俊;黃艷;李健;關欣蘭;鄧勝平
• 申請（專利權）人: 廣西師范大學
• 主分類號: C07H17/04
• 分類號: C07H17/04;C07H15/24;C07H1/08;A61K31/7048;A61K31/704;A61P31/20
• 代理公司: 桂林市華杰專利商標事務所有限責任公司 45112
• 代理人: 覃永峰

1.一種大萼香茶菜皂苷A和B單體的分離純化方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)將大萼香茶菜全植株用10-15個質量比的50％-75％乙醇水溶液提取，得到大萼香茶菜全植株的提取物，回收提取液的乙醇后，余下的水部分用10倍蒸餾水稀釋，得到大萼香茶菜全植株粗提物水溶液；

2)將步驟1)得到的大萼香茶菜全植株粗提物水溶液進行弱極性或非極性苯乙烯型大孔吸附樹脂柱層析，充分吸附后，用4-6個柱體積蒸餾水沖洗，去除未被吸附的雜質，再依次各用4-6個柱體積的20％-30％乙醇水溶液洗脫、棄去洗脫液，然后以4-6個柱體積的31％-60％乙醇水溶液洗脫，濃縮洗脫液，得到富含大萼香茶菜皂苷A和B的洗脫部分，其中，大孔吸附樹脂為D101或AB-8；

3)用甲醇溶解步驟2)得到的31％-60％乙醇水溶液洗脫部分樣品，然后進行硅膠色譜柱層析，依次各用4-6個柱體積的70％-30％的二氯甲烷與30％-70％的甲醇混合液作為洗脫劑進行洗脫，棄去70％的二氯甲烷與30％的甲醇混合液洗脫液，收集30％的二氯甲烷與70％的甲醇混合液洗脫物；

4)將步驟3)收集的30％的二氯甲烷與70％的甲醇混合液洗脫物進行高效液相色譜C₁₈柱層析，獲得大萼香茶菜皂苷A和B，結構式分別如式(I)所示：

2.根據(jù)權利要求1所述的大萼香茶菜皂苷A和B單體的分離純化方法，其特征在于，步驟1)中所述的大萼香茶菜全植株的提取物由如下方法制得：將大萼香茶菜全植株粉碎、加入全植株10-15倍質量的濃度為50％-75％的乙醇水溶液，加熱回流提取2-3次，減壓濃縮、干燥，得大萼香茶菜全植株的提取物。

3.根據(jù)權利要求1所述的大萼香茶菜皂苷A和B單體的分離純化方法，其特征在于，步驟3)中所述硅膠色譜柱為正相硅膠色譜柱。

4.根據(jù)權利要求1所述的大萼香茶菜皂苷A和B單體的分離純化方法，其特征在于，步驟3)中的純化過程為：將步驟2)中31％-60％的乙醇水溶液洗脫、富含大萼香茶菜皂苷A和B的樣品進行硅膠柱層析，依次用4-6個柱體積的30％-70％的二氯甲烷與60％-30％的甲醇混合液作為洗脫劑進行梯度洗脫。

5.根據(jù)權利要求1所述的大萼香茶菜皂苷A和B單體的分離純化方法，其特征在于，步驟4)中所述的高效液相色譜的色譜柱為反相十八烷基硅烷鍵合硅膠C₁₈色譜柱。

6.根據(jù)權利要求1所述的大萼香茶菜皂苷A和B單體的分離純化方法，其特征在于，步驟4)中所述的將步驟3)中收集的30％的二氯甲烷與70％的甲醇混合液洗脫物進行高效液相色譜C₁₈柱層析純化過程為：將30％的二氯甲烷與70％的甲醇混合液洗脫物加入反相C₁₈硅膠色譜柱中，用體積濃度為30-70％甲醇水溶液洗脫，分別得到大萼香茶菜皂苷A和B單體化合物。

7.權利要求1-6任意一項所述方法所制備的大萼香茶菜皂苷單體在制備抗HBV類藥物中的應用。