[發明專利]一種毒害艾美耳球蟲亞單位疫苗及其制備方法和應用在審
| 申請號： | 202210194122.3 | 申請日： | 2022-03-01 |
| 公開（公告）號： | CN114480433A | 公開（公告）日： | 2022-05-13 |
| 發明（設計）人： | 譚志堅;周德榮;蔣嘉豪;林瑞慶;翁亞彪;劉麗丹;王新秋;黃儀娟;劉葉萍 | 申請（專利權）人： | 佛山市正典生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/30 | 分類號： | C12N15/30;C07K14/455;C12N15/70;A61K39/012;A61P33/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京品源專利代理有限公司 11332 | 代理人： | 潘登 |
| 地址： | 528138 廣東省*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 毒害 艾美耳球蟲亞 單位 疫苗 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種毒害艾美耳球蟲亞單位疫苗，其特征在于，所述毒害艾美耳球蟲亞單位疫苗包括毒害艾美耳球蟲SAG13蛋白；
所述毒害艾美耳球蟲SAG13蛋白的氨基酸序列包括SEQ ID NO.1所示的序列。
2.根據權利要求1所述的毒害艾美耳球蟲亞單位疫苗，其特征在于，所述毒害艾美耳球蟲亞單位疫苗還包括佐劑；
優選地，所述佐劑包括不完全弗氏佐劑和完全弗氏佐劑。
3.根據權利要求2所述的毒害艾美耳球蟲亞單位疫苗，其特征在于，所述毒害艾美耳球蟲亞單位疫苗中所述毒害艾美耳球蟲SAG13蛋白和所述佐劑的體積比為1:(0.5～3)。
4.一種如權利要求1-3任一項所述的毒害艾美耳球蟲亞單位疫苗的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括：
將編碼所述毒害艾美耳球蟲SAG13蛋白的核酸序列插入載體中，得到重組表達載體，將所述重組表達載體導入宿主細胞，進行細胞培養，進行蛋白質純化，收集毒害艾美耳球蟲SAG13蛋白，得到所述毒害艾美耳球蟲亞單位疫苗。
5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述載體包括質粒載體、病毒載體或噬菌體載體中的任意一種；
優選地，所述質粒載體包括pET30a；
優選地，所述編碼所述毒害艾美耳球蟲SAG13蛋白的核酸序列包括SEQ ID NO.2所示的序列；
優選地，所述編碼所述毒害艾美耳球蟲SAG13蛋白的核酸序列被插入所述pET-30a的5’-NdeⅠ和3’-HindⅢ酶切位點之間。
6.根據權利要求4或5所述的制備方法，其特征在于，所述導入的方法包括化學誘導法、電轉化法、熱激法或基因槍法中的任意一種；
優選地，所述宿主細胞包括細菌或哺乳動物細胞；
優選地，所述細菌包括大腸桿菌。
7.根據權利要求4-6任一項所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法還包括將所述毒害艾美耳球蟲SAG13蛋白與佐劑混合的步驟。
8.權利要求4-7任一項所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：
(1)將編碼所述毒害艾美耳球蟲SAG13蛋白的核酸序列插入質粒載體中，得到重組表達載體；
(2)將所述重組表達載體導入大腸桿菌，進行細胞培養；
(3)收集細胞并進行裂解，得到細胞裂解液，過濾，并進行蛋白質純化，收集毒害艾美耳球蟲SAG13蛋白；
(4)將所述毒害艾美耳球蟲SAG13蛋白與佐劑混合，得到所述毒害艾美耳球蟲亞單位疫苗。
9.權利要求1-3任一項所述的毒害艾美耳球蟲亞單位疫苗在制備預防毒害艾美耳球蟲感染的藥物中的應用。
10.一種藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物包括權利要求1-3任一項所述的毒害艾美耳球蟲亞單位疫苗；
優選地，所述藥物組合物還包括輔料；
優選地，所述輔料包括藥學上接受的載體、稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、潤濕劑、崩解劑、乳化劑、助溶劑、增溶劑、滲透壓調節劑、表面活性劑、包衣材料、著色劑、pH調節劑、抗氧劑、抑菌劑或緩沖劑中的任意一種或至少兩種的組合。
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