[發明專利]SRSF5結合蛋白的PCR檢測試劑盒及檢測方法在審
| 申請號: | 202210185587.2 | 申請日: | 2022-02-28 |
| 公開(公告)號: | CN114317836A | 公開(公告)日: | 2022-04-12 |
| 發明(設計)人: | 余樹芳;袁旦一;陳斌;何謙;辜良斌;李曉琪;張丹 | 申請(專利權)人: | 成都納比微特檢測技術服務有限公司;成都納比生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司: | 重慶樂泰知識產權代理事務所(普通合伙) 50221 | 代理人: | 林慰敏 |
| 地址: | 610200 四川省成都市天府新區*** | 國省代碼: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | srsf5 結合 蛋白 pcr 檢測 試劑盒 方法 | ||
1.SRSF5結合蛋白的PCR檢測試劑盒,其特征在于:包括上游引物SRSF5-F和下游引物SRSF5-R,核苷酸序列分別如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。
2.根據權利要求1所述的SRSF5結合蛋白的PCR檢測試劑盒,其特征在于:試劑盒還包括:Green Realtime PCR Master Mix,模板cDNA和無菌水。
3.根據權利要求2所述的SRSF5結合蛋白的PCR檢測試劑盒,其特征在于:所述的Green Realtime PCR Master Mix的組成包括:dNTPs、MgCl2、Taq DNA多聚酶、抗Taq單克隆抗體。
4.根據權利要求2所述的SRSF5結合蛋白的PCR檢測試劑盒,其特征在于:具體的組成為:每20uL反應液中包含了:Green Realtime PCR Master Mix 10μL,上游引物0.8-1.0μL,下游引物0.8-1.0μL,模板RNA 2.0-3.0μL,余量為無菌水;所述上游引物和下游引物的濃度均為10pmol/μL。
5.權利要求1-4任一項所述的SRSF5結合蛋白的實時熒光定量PCR檢測方法,其特征在于,包括以下步驟:
a、用RNA提取試劑盒從待檢樣品中提取RNA;
b、將提取的RNA與流感病毒生命周期中關鍵RNA結合蛋白SRSF5的實時熒光定量PCR檢測試劑盒中的試劑混合,進行qPCR反應;
c、反應結束后及時進行結果判讀。
6.根據權利要求5所述的SRSF5結合蛋白的實時熒光定量PCR檢測方法,其特征在于:步驟a中所述的待檢樣品包括:宿主的血液或組織樣品。
7.根據權利要求5所述的SRSF5結合蛋白的實時熒光定量PCR檢測方法,其特征在于:步驟b所述的qPCR反應的條件為:55℃15min;95℃30s;95℃10s;60℃30s后兩步進行40個循環。
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