[發明專利]一種用于聯合檢測傷寒細菌IgG和IgM的試劑條

在審

• 申請號: 202210178908.6
• 申請日: 2022-02-25
• 公開（公告）號: CN114609390A
• 公開（公告）日: 2022-06-10
• 發明（設計）人: 張茂泉;李智彪;陳亨利;周旻
• 申請（專利權）人: 英科新創（廈門）科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/569;G01N33/558;G01N33/577;G01N33/58
• 代理公司: 廈門致群財富專利代理事務所(普通合伙) 35224
• 代理人: 劉兆慶

本發明公開了一種用于聯合檢測傷寒細菌IgG和IgM的試劑條，包括底板，底板上方從前往后順次粘貼有樣品墊、金標墊、NC膜和吸樣墊，NC膜上從前往后依次設有IgM檢測線、IgG檢測線和質控線，金標墊含有傷寒H抗原?膠體金復合物、傷寒O抗原?膠體金復合物和兔IgG抗體?膠體金復合物，IgM檢測線上包被有鼠抗人u鏈單抗，IgG檢測線上包被有鼠抗人IgG單抗，質控線上包被有羊抗兔IgG單抗。本發明的試紙條僅需一次加樣就能實現傷寒細菌IgG和IgM的聯合檢測，操作簡單，且大大縮短了檢測時間，提高檢測效率、靈敏度和特異性。

技術領域

本發明涉及免疫學檢測裝置技術領域，特別涉及一種用于聯合檢測傷寒細菌IgG和IgM的試劑條。

背景技術

目前檢測傷寒的方法主要是細菌培養法和肥達實驗法。細菌培養法是檢測傷寒細菌的金標準，但是細菌培養的周期長，檢測時間需要5天以上，而且容易受到抗生素等因素的影響而導致漏檢；肥達試驗法中，肥達反應一般在傷寒病程第二周才出現陽性，且特異性較差、靈敏度不高，陽性率也較低。上述兩種方法都存在檢測時間較長、效率低下的缺陷。

發明內容

為解決上述問題，本發明提供了一種用于聯合檢測傷寒細菌IgG和IgM的試劑條。

本發明采用以下技術方案：

一種用于聯合檢測傷寒細菌IgG和IgM的試劑條，包括底板，所述底板上方從前往后順次粘貼有樣品墊、金標墊、NC膜和吸樣墊，所述NC膜上從前往后依次設有IgM檢測線、IgG檢測線和質控線，所述金標墊含有傷寒H抗原-膠體金復合物、傷寒O抗原-膠體金復合物和兔IgG抗體-膠體金復合物，所述IgM檢測線上包被有鼠抗人u鏈單抗，所述IgG檢測線上包被有鼠抗人IgG單抗，所述質控線上包被有羊抗兔IgG單抗。

進一步地，所述底板采用聚酯板。

進一步地，所述金標墊的制備方法為：將所述傷寒H抗原-膠體金復合物、傷寒O抗原-膠體金復合物、兔IgG抗體-膠體金復合物按1:1:0.5混合后，均勻涂抹于所述NC膜上凍干3-5h。

進一步地，所述傷寒H抗原-膠體金復合物的制備方法為：按10-20μg/mL的比例往膠體金分散液中快速加入傷寒H抗原，并用攪拌器快速攪拌，反應15-30min后，按10-15μL/mL的比例快速加入封閉液，反應10-30min后，離心后棄上清液得沉淀，按100μL/mL的比例往該沉淀中加入復溶液，超聲復溶，獲得傷寒H抗原-膠體金復合物。

進一步地，所述傷寒O抗原-膠體金復合物的制備方法為：按10-20μg/mL的比例往膠體金分散液中快速加入傷寒O抗原單抗，并用攪拌器快速攪拌，反應15-30min后，按10-15μL/mL的比例快速加入封閉液，反應10-30min，離心后棄上清液得沉淀，用pH值7.4的20mmPB緩沖液復溶，按10-20μg/mL的比例加入傷寒O抗原，室溫反應1小時，離心后棄上清液得沉淀，按100μL/mL的比例往該沉淀中加入復溶液，超聲復溶，獲得傷寒O抗原-膠體金復合物。

進一步地，所述兔IgG抗體-膠體金復合物的制備方法為：按5-15μg/mL的比例往膠體金分散液中快速加入兔IgG抗體，并用攪拌器快速攪拌，反應15-30min后，按10-15μL/mL的比例快速加入封閉液，反應10-30min，離心后棄上清液得沉淀，按100μL/mL的比例往該沉淀中加入復溶液，超聲復溶，制成兔IgG抗體-膠體金復合物。

進一步地，所述膠體金分散液中的膠體金顆粒大小為40-60nm、濃度為0.01-0.03wt％；所述離心的條件為：轉速8000-10000rpm，時間25-30min。

進一步地，所述IgM檢測線的包被方法為：將鼠抗人u鏈單抗用包被緩沖液稀釋到1-3mg/mL后進行混合包被，再于18-25℃干燥20-25h。