[發明專利]一種組織-細胞-細胞器三級靶向的仿生制劑及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202210161929.7
• 申請日: 2022-02-22
• 公開（公告）號: CN115177739A
• 公開（公告）日: 2022-10-14
• 發明（設計）人: 雷光華;鄧彩鳳;曾超
• 申請（專利權）人: 中南大學湘雅醫院
• 主分類號: A61K47/64
• 分類號: A61K47/64;A61K47/69;A61K31/203;A61P29/00;A61P19/02;C12N5/078;C07K7/06
• 代理公司: 長沙朕揚知識產權代理事務所(普通合伙) 43213
• 代理人: 郭蓓霏

本發明公開了一種組織?細胞?細胞器三級靶向的仿生制劑，包括載生物活性物質的納米顆粒和覆蓋在納米顆粒表面的經高爾基體靶向肽修飾的活化血小板膜，納米顆粒為聚合物納米顆粒或脂質體，高爾基體靶向肽包含氨基酸序列SXYQRL，其中X代表任意氨基酸。該制劑可實現對關節炎?滑膜成纖維細胞?高爾基體的三級靶向藥物遞送，可通過擾亂高爾基體的功能，從而阻斷滑膜成纖維細胞分泌造成滑膜炎和骨侵蝕的細胞因子和酶，最終實現RA的有效治療。還公開了該仿生制劑的制備方法，操作簡單，成本低廉，制備高效。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，特別是一種組織-細胞-細胞器三級靶向的仿生制劑及其制備方法和應用。

背景技術

類風濕性關節炎(RA)是一種以慢性侵蝕性關節炎為特征的自身免疫性疾病，隨著疾病進展，RA將導致患者關節變性甚至造成殘疾。通常認為，滑膜巨噬細胞是RA關節滑膜中重要的免疫細胞，在RA的發生和發展過程中具有重要作用，常常作為RA的治療靶點，藥物遞送系統的研究也主要圍繞著巨噬細胞展開。抑制滑膜巨噬細胞的活化或阻斷其介導的細胞因子信號，通常可一定程度降低RA滑膜炎癥，但這些方法對滑膜炎的持續性進展和骨破壞的保護作用有限。另外，這些治療方式對30％的患者無效，仍需要尋找更有效的治療方式。

近年來，研究者逐漸認識到RA關節滑膜成纖維細胞可通過分泌多種細胞因子和酶，從而造成滑膜炎和骨侵蝕。因此，將藥物有效遞送至滑膜成纖維細胞并有效阻斷其分泌的病理性細胞因子和酶對于RA治療具有重要意義。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是，克服以上背景技術中提到的不足和缺陷，提供一種可實現組織-細胞-細胞器三級靶向的仿生制劑，最終實現RA的有效治療。

為解決上述技術問題，本發明提出的技術方案為：

一種組織-細胞-細胞器三級靶向的仿生制劑，包括載生物活性物質的納米顆粒和覆蓋在所述納米顆粒表面的經高爾基體靶向肽修飾的活化血小板膜，所述納米顆粒為聚合物納米顆粒或脂質體，所述高爾基體靶向肽包含氨基酸序列SXYQRL，其中X代表任意氨基酸，如序列表SEQ ID NO:1所示。

本發明的仿生制劑可通過活化血小板膜對炎癥的趨向性實現對RA的炎性關節靶向，然后通過整合素α2β1介導的內吞，靶向滑膜成纖維細胞，最后在高爾基體靶向肽(含氨基酸序列SXYQRL的多肽可實現從內涵體到高爾基體的逆轉運，從而定位在高爾基體上)的介導下，富集在滑膜成纖維細胞的高爾基體上。利用該仿生制劑遞送高爾基體干擾劑(如全反式維甲酸)，可以特異性地高效破壞RA滑膜成纖維細胞的高爾基體結構，以有效地阻斷基于滑膜成纖維細胞的多重致病因子(如致炎性細胞因子、趨化因子以及基質降解酶等)，從而實現對RA滑膜炎以及骨侵蝕的有效治療。

上述的組織-細胞-細胞器三級靶向的仿生制劑，優選的，所述活化血小板膜為經血小板活化劑激活后所得的血小板膜或血小板微粒膜；所述聚合物納米顆粒為PLGA納米粒；所述生物活性物質為高爾基體干擾劑。

優選的，所述高爾基體干擾劑為全反式維甲酸及其衍生物。

優選的，所述經高爾基體靶向肽修飾的活化血小板膜通過化學合成或基因工程的方式制備得到。

基于一個總的發明構思，本發明還提供一種組織-細胞-細胞器三級靶向的仿生制劑的制備方法，包括如下步驟：

(1)將經過N-羥基琥珀酰亞胺活化的高爾基體靶向肽與活化血小板膜共同孵育，得到經高爾基體靶向肽修飾的活化血小板膜；

(2)制備聚合物納米顆粒混懸液或脂質體液；

(3)將所述經高爾基體靶向肽修飾的活化血小板膜和所述聚合物納米顆粒混懸液或脂質體液共同孵育，然后通過超聲或擠壓過微孔濾膜的方式制成仿生制劑，即得。