[發明專利]人PD-L1蛋白第162位賴氨酸的甲基化修飾在預測惡性腫瘤免疫治療敏感性的應用

有效

• 申請號: 202210158718.8
• 申請日: 2022-02-21
• 公開（公告）號: CN115290895B
• 公開（公告）日: 2023-07-28
• 發明（設計）人: 王桂華;胡俊波;黃昌勝;李潤清
• 申請（專利權）人: 武漢百英諾生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/577;G01N33/68
• 代理公司: 南京縱橫知識產權代理有限公司 32224
• 代理人: 祝蓉蓉

本發明公開了一種人PD?L1蛋白第162位賴氨酸的甲基化修飾在預測惡性腫瘤免疫治療敏感性的應用，其可以用于制備預測惡性腫瘤免疫治療敏感性的產品，例如能特異性識別人PD?L1蛋白第162位賴氨酸甲基化修飾的多克隆抗體或單克隆抗體，或是含有上述多抗或單抗的試劑盒，或是用于擴增制備上述多抗和單抗的試劑盒。通過上述多抗或單抗檢測第162位賴氨酸的甲基化修飾的人PD?L1蛋白的表達量，進而判斷待測樣本使用抗PD?1或抗PD?L1免疫治療的敏感性，為指導臨床使用抗PD?L1及PD?1單抗提新的依據可能。

技術領域

本發明屬于生物醫藥及腫瘤治療技術領域，特別是人PD-L1蛋白第162位賴氨酸的甲基化修飾在預測惡性腫瘤免疫治療敏感性的應用。

背景技術

隨著程序性死亡受體配體(PD-L1)及細胞毒性T淋巴細胞相關蛋白4(CTLA4)免疫檢查點的不斷發現，針對腫瘤病人的免疫治療技術越來越受到關注。PD-L1是一種免疫球蛋白樣的免疫抑制因子，存在于各種細胞中，包括腫瘤細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞(DCs)和癌相關成纖維細胞(CAFs)。PD-L1的配體程序性死亡受體(PD-1)主要表達于T細胞上。腫瘤細胞表面的PD-L1能夠與腫瘤浸潤T淋巴細胞(CTLs)上的PD-1相互作用，從而抑制T細胞的增殖，減弱T細胞的細胞因子分泌，負調節T細胞介導的細胞毒性，最終導致腫瘤細胞逃逸機體免疫系統對腫瘤細胞的殺傷作用。

多項臨床實驗表明使用抗PD-L1單克隆抗體(單抗)或者抗PD-1單克隆抗體，可以阻斷PD-1/PD-L1的相互作用，使得CTLs再次活化，進而使得機體免疫系統殺傷異常的腫瘤細胞，使得腫瘤患者預后明顯改善。根據美國國立綜合癌癥網絡(NCCN)指南顯示，腫瘤中PD-L1表達≥50％且無腫瘤驅動基因突變的患者可以接受抗PD-L1單抗單藥治療。然而，多項臨床研究表明抗PD-L1治療在各種腫瘤中的應答率僅為15-45％；此外，還有多項臨床試驗表明，PD-L1低表達的患者也可受益于抗PD-L1治療。這些臨床證據表明單純性將PD-L1表達量作為是否使用PD-L1單抗的判斷依據仍然存在爭議。

既往研究表明，PD-L1的磷酸化、棕櫚?；吞腔揎椖軌蛟鰪奝D-L1的穩定性，使得腫瘤細胞表面的PD-L1表達量升高，進而促進腫瘤細胞的免疫逃逸。然而，PD-L1的甲基化修飾及其生物學功能尚未有人報道。

發明內容

針對以上現有技術的不足，本發明提供了了一種涉及人PD-L1蛋白第162位賴氨酸發生的甲基化修飾現象，在預測/評價惡性腫瘤抗-PD-1或抗PD-L1免疫治療敏感性中的應用，同時還相應地提供了一種可以真實反應PD-L1蛋白162位賴氨酸甲基化水平的抗體。采用本發明提供的抗體，能夠特異性識別PD-L1蛋白162位賴氨酸甲基化，可以用于指導篩選出惡性腫瘤抗PD-1或抗PD-L1免疫治療敏感的患者，具體通過以下技術實現。

人PD-L1蛋白第162位賴氨酸的甲基化修飾在制備預測惡性腫瘤免疫治療敏感性的產品中的應用。

優選地，上述應用方法中，預測惡性腫瘤免疫治療敏感性的產品是特異性識別人PD-L1蛋白第162位賴氨酸甲基化修飾的多克隆抗體或單克隆抗體。在利用上述人PD-L1蛋白第162位賴氨酸的甲基化修飾的功能作用時，可以直接使用能特異性識別該甲基化修飾的多抗或單抗，判斷出該甲基化修飾表達的人PD-L1蛋白所占比例，由此判斷惡性腫瘤使用抗-PD-1或抗PD-L1免疫治療的敏感性。

優選地，上述應用方法中，預測惡性腫瘤免疫治療敏感性的產品是含有特異性識別人PD-L1蛋白第162位賴氨酸甲基化修飾的多克隆抗體或單克隆抗體的檢測試劑盒。該試劑盒可以用于直接預測惡性腫瘤免疫治療敏感性。將其中包含的多抗或單抗直接使用即可。同時，試劑盒中還可以包括檢測所必需的常規緩沖液、洗滌液、包被液等試劑。