[發明專利]基于SCAR分子標記鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的方法

在審

• 申請號: 202210156994.0
• 申請日: 2022-02-21
• 公開（公告）號: CN114438248A
• 公開（公告）日: 2022-05-06
• 發明（設計）人: 蔣研風羊;晁志;鄭如文;謝雪那;劉宏;黃榮;杜海泳
• 申請（專利權）人: 廣州白云山光華制藥股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 廣州廣典知識產權代理事務所(普通合伙) 44365
• 代理人: 顧書玲;萬志香

本發明公開了一種基于SCAR分子標記鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的方法，所述SCAR分子標記的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；所述引物對的正向引物的序列如SEQ ID No.2所示，反向引物的序列如SEQ ID No.3所示。本發明的SCAR分子標記、以及引物對，可以特異性地、準確地鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡，為竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的開發利用與保護提供研究基礎，亦可為其它中藥材遺傳特性和鑒別提供借鑒。

技術領域

本發明屬于藥材檢測技術領域，更具體地，本發明涉及一種鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的SCAR分子標記、引物對、以及基于SCAR分子標記鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的方法。

背景技術

柴胡屬是分類和系統發育研究中的一個“困難”類群，在柴胡屬的植物鑒定中，常以小總苞片的寬度、葉的形狀、傘幅的多少及果實棱槽油管數等常作為主要分類依據。而對于柴胡藥材而言，由于藥材之間形態、結構極近似，性狀、顯微(組織構造和粉末)等傳統鑒定方法有比較大的難度，即使是有豐富經驗的專業人員或藥師，也費時費力，并且不能保證精確無誤。

竹葉柴胡，性味苦寒，具有散風退熱、疏肝解郁之功效，可用于感冒發熱。西南地區慣用竹葉柴胡的全草入藥，其曾在一定時期作為正品柴胡來使用。竹葉柴胡及其變種窄竹葉柴胡為目前市場上藥材柴胡的主要三大來源之一。但不同種柴胡藥材的臨床療效并不相同，在使用時還應與正品北柴胡、狹葉柴胡加以區分。

在普通DNA條形碼鑒定技術中，ITS、trnH-psbA、matK、rbcL和rps16等DNA分子標記為柴胡屬植物的分類鑒定與系統學研究提供了重要依據。然而，雖然柴胡屬的單系性已經得到分子證據的支持，但屬內不同物種間的系統發育關系目前仍然存在爭議。

中藥資源準確的基原鑒定，是保證用藥安全有療效的關鍵。因此，建立一種準確、快速、可靠的柴胡藥材鑒定方法，對保障柴胡藥材的質量及用藥安全具有重要意義。

在柴胡屬葉綠體基因組中富含大量的遺傳信息，如大量單核苷酸多態性位點(SNP)、插入缺失位點、結構變異位點和拷貝數變異位點，這也將對柴胡屬植物分類、藥材鑒定研究有重要的指導意義。

SCAR(Sequence characterized amplified regions，序列特征擴增區域)標記技術，是用特異引物對基因組DNA進行擴增，獲得可以反映標記性狀的特異DNA片段的技術，通常在不同的個體之間表現為存在或缺失，在圖譜中通常為單一條帶的有或無，簡單、結果可靠、成本低，可用于作物雜交育種、品種鑒定和混偽品的鑒別當中。

提供一種基于SCAR分子標記的、適合于鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的方法非常有意義。

發明內容

基于此，本發明的目的之一在于提供一種鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的SCAR分子標記，該SCAR分子標記可以特異地、準確地鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡。

實現上述發明目的的具體技術方案包括如下：

一種鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的SCAR分子標記，所述SCAR分子標記的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

本發明還提供了上述SCAR分子標記在鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡中的應用。

本發明還提供了一種鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的引物對，所述引物對包括：如SEQ ID No.2所示的正向引物和如SEQ ID No.3所示的反向引物。

本發明還提供了上述引物對在鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡中的應用。

本發明還提供了上述引物對在制備鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的制劑中的應用。

本發明還提供了一種鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的制劑，所述制劑包括上述引物對。